北京蛋白蛋白互作检测CoIP-WB

结合了抗体的磁珠或树脂（Beads）与样本裂解液孵育，通过”抗原-抗体“之间的免疫作用，诱饵蛋白被吸附在Beads上，与此同时，诱饵蛋白的互作蛋白，也一起“共沉淀”到Beads上。洗涤去掉未结合的蛋白后，再用洗脱缓冲液将互作蛋白复合物从Beads上洗脱下来，得到免疫共沉淀（Co-IP）产物。Co-IP产物既可以用WesternBlot检测已知蛋白，也可以用质谱鉴定未知蛋白。当没有合适的诱饵蛋白抗体时，还可以通过表达融合了Flag标签的诱饵蛋白，利用Flag标签抗体做免疫沉淀。即样本过表达Flag-Bait，经裂解后与anti-Flag珠子孵育，诱饵融合蛋白与Beads结合，其互作蛋白“共沉淀”到Beads上，再经洗涤、洗脱后，用WB或质谱检测。Co-IP高特异灵敏，适用多样本，兼容质谱，操作简便，优势大！北京蛋白蛋白互作检测CoIP-WB

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）的优点主要包括：高度特异性：免疫共沉淀利用高亲和力的抗体与目标蛋白结合，能够高度特异性地识别目标蛋白质，从而减少假阳性和假阴性的误差，提高实验结果的准确性。可控性强：免疫共沉淀实验的反应条件相对稳定，实验长度、温度、蛋白浓度、抗体浓度等可被有效控制，这样可以有效地减少误差和变异性。可用于研究蛋白相互作用：免疫共沉淀不仅可以检测单个蛋白质，还可以研究蛋白质之间的相互作用，从而揭示蛋白质的组装和功能。这对于理解细胞内的信号转导、代谢途径等复杂生物过程具有重要意义。天然状态：通过免疫共沉淀得到的蛋白质相互作用是在自然状态下进行的，避免了人为影响，可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合物。这对于理解蛋白质在细胞内的真实功能和相互作用模式具有重要意义。可逆性：免疫共沉淀实验是可逆的，在沉淀后的蛋白质可以被再次溶解和分离进行下一步操作或其他科学研究。操作简便：免疫共沉淀的实验流程相对简便，不需要事先制备大规模蛋白表达文库，使得这种方法在实验室中易于实施。广东CoIP-WB检测免疫共沉淀法特异性强、可控性高，可用于研究蛋白互作，反映天然状态，可逆且操作简便。

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种在生物药物领域广泛应用的技术，主要用于研究蛋白质之间的相互作用。该技术通过利用特异性抗体将目标蛋白与其相互作用的蛋白一同沉淀下来，从而揭示蛋白质间的相互作用关系。Co-IP（免疫共沉淀）技术的结果通常是可靠的，但也需要注意一些潜在的限制和影响因素。首先，Co-IP技术能够直接检测蛋白质之间的相互作用，因此可以提供较为直接和可靠的结果。其次，Co-IP技术可能受到样品纯度、抗体质量、实验条件等多种因素的影响。另外，为了确保结果的准确性，研究人员通常会使用多种方法进行相互验证。综上所述，Co-IP技术的结果通常是可靠的，但需要注意潜在的限制和影响因素，并采取适当的措施来确保结果的准确性。

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是一种基于抗原与抗体特异性结合用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。常用于候选目标蛋白质之间是否有相互作用，也用于确定与已知蛋白质互作的其它未知蛋白质相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。免疫共沉淀实验流程：蛋白质样本收集-A抗体沉淀目的蛋白A-SDS-PAGE分离-WB检测B蛋白或者质谱鉴定互作蛋白。Co-IP的优点主要包括高特异性、灵敏度高、与质谱技术兼容、操作相对简便。IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）技术应用场景。

CoIP-Mass应用场景：CoIP-Mass：用于构建目的蛋白的蛋白互作组数据，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作组差异。CoIP-WB：用于验证目的蛋白和候选蛋白的相互作用关系，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作变化。

CoIP-Mass和CoIP-WB技术价值：（1）蛋白质相互作用数据是机制研究的重要基础内容，体现机制研究的严谨性，能明显提高临床基础类研究文章的档次。（2）细胞内蛋白互作处于动态变化过程，在不同条件下可发生动态变化，蛋白动态互作组检测，是蛋白互作机制的亮点。（3）蛋白互作，往往是结构域或部分关键区段的互作，可通过蛋白区段拆分，进一步明确互作的结构域，提升机制研究的高度，为靶点转化提供关键切入点。 Co-IP实验初学者需慎选抗体、规范操作、解读结果、确保安全，不断实践积累经验！免疫沉淀CoIP-Mass检测

Co-IP技术直接、特异、灵敏，是研究蛋白质相互作用的有力工具，揭示生命奥秘！北京蛋白蛋白互作检测CoIP-WB

IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）实验要点主要包括以下几个步骤：样品制备：确保样品新鲜且未经过多次冻融，以避免蛋白降解。裂解细胞或组织，获得含有目标蛋白及其相互作用伙伴的裂解液。免疫沉淀：选择特异性强的抗体，与目标蛋白结合形成复合物。将复合物与固相载体（如磁珠）结合，通过洗涤去除非特异性结合的杂质。电泳分离：将免疫沉淀得到的蛋白质复合物进行SDS-PAGE凝胶电泳，按照分子量大小分离蛋白质。Western Blot检测：将电泳后的蛋白质转移到固相膜上，利用特异性抗体检测目标蛋白或其相互作用伙伴的存在。通过显色反应可视化目标蛋白，确保特异性结合。结果分析：观察Western Blot结果，分析目标蛋白与其相互作用伙伴的相互作用情况，为后续研究提供依据。北京蛋白蛋白互作检测CoIP-WB