定性基因扩增仪(PCR 仪)是分子生物学领域用于实现聚合酶链式反应(PCR)的设备,其通过精确控制温度循环,使 DN段在体外实现指数级扩增,为基因检测、疾病诊断、科研等提供关键技术支持。PCR的原理是利用DNA的热变性、复性及延伸特性,通过循环控温实现DNA扩增,具体过程如下:变性阶段:将反应体系加热至94-96℃,使双链DNA解旋为单链。退火阶段:降温至50-65℃,让引物与单链DNA的特定区域互补结合。延伸阶段:升温至72℃左右,DNA聚合酶以引物为起点,沿模板链合成新的DNA链。循环重复:上述三步为一个循环,通常进行25-40次,使目标DNA片段以2ⁿ的倍数扩增(n为循环数)。若需优化退火温度,可选择带梯度 PCR 功能的型号,能在同一实验中测试多个退火温度,快速确定条件。无锡普通基因扩增仪PCR仪代理商

在保障农产品质量安全、品种改良和动植物疫病防控中应用较广。转基因作物检测:定量检测农作物中转基因成分的含量,判断是否符合相关标准(如我国规定转基因食品需标注,qPCR可精细测定转基因片段的拷贝数)。动植物疫病检测:快速检测畜禽或农作物中的病原体(如禽流感病毒、猪瘟病毒、植物病毒等),实现疫病的早期预警和防控,减少经济损失。品种鉴定与育种:通过分析特定基因的表达量或基因型,鉴定农作物或畜禽的品种纯度,辅助优良品种的选育(如抗虫、抗病品种的筛选)。江苏单槽基因扩增仪PCR仪代理商单槽基因扩增仪 PCR 仪体积紧凑、能耗较低,凭借稳定的扩增性能助力基层医疗机构基因检测工作。

定性基因扩增仪(PCR 仪)凭借其高灵敏度和特异性的基因检测能力,在多个行业中承担着关键角色。1. 基因克隆与功能研究场景:目的基因的扩增、载体构建(如将目标基因插入质粒)、基因突变(点突变、缺失突变)验证。技术价值:通过 PCR 扩增目的基因片段,结合酶切、连接等操作,实现基因在宿主细胞中的表达研究(如蛋白功能分析)。设备需求:梯度 PCR 仪(优化引物退火温度)+ 低通量模块(8 联管),便于多条件实验设计。2. 分子进化与群体遗传学场景:物种亲缘关系分析(如扩增 16S rRNA 基因研究微生物进化)、种群基因频率检测(如人类 HLA 基因多态性分析)。技术价值:通过 PCR 产物测序,比对不同物种或个体的基因序列差异,构建进化树或群体遗传图谱。
在基因功能、调控机制等基础研究中,qPCR是不可或缺的工具,主要用于基因表达水平的定量分析。基因表达分析:通过定量比较不同组织、不同发育阶段或不同处理条件下目的基因的mRNA表达量,探究基因的功能及调控机制。例如,研究某种药物对细胞中特定基因表达的影响,或比较正常组织与病变组织中基因表达的差异。基因分型与SNP分析:结合特异性探针或引物,可对单核苷酸多态性(SNP)进行快速分型,用于研究基因多态性与疾病易感性、药物反应差异等的关联。基因拷贝数变异(CNV)分析:检测基因组中特定基因的拷贝数是否异常,为研究染色体结构变异与疾病的关系提供数据支持。常规 qPCR 仪与快速 qPCR 仪:快速 qPCR 仪通过优化加热模块,缩短升降温时间,提高实验效率。

放入 PCR 仪:将配置好的反应管放入基因扩增仪 PCR 仪中,按照设定的程序进行扩增反应。设置扩增程序:一般包括预变性、变性、退火、延伸和终延伸等步骤。预变性步骤通常在 94℃-95℃下进行 5-10 分钟,使 DNA 双链充分解开;变性温度一般为 94℃-95℃,时间为 30-60 秒,使模板 DNA 双链解链;退火温度根据引物的 Tm 值确定,一般在 50℃-65℃之间,时间为 30-60 秒,使引物与模板 DNA 特异性结合;延伸温度通常为 72℃,时间根据扩增片段长度而定,一般为 1-2 分钟 /kb;终延伸步骤在 72℃下进行 5-10 分钟,确保所有扩增产物延伸完整。循环次数一般为 30-40 次。变性温度不足会导致 DNA 解链不完全,退火温度偏差可能引发非特异性结合。无锡定量基因扩增仪PCR仪哪个好
双槽基因扩增仪 PCR 仪支持双样本并行扩增,大幅提升检测效率,适配中等批量基因检测需求。无锡普通基因扩增仪PCR仪代理商
启动反应与结果分析确认参数无误后,启动 qPCR 程序,仪器自动运行并实时显示荧光曲线。反应结束后,通过软件查看结果:定量结果:根据标准曲线计算未知样本的初始模板浓度(定量),或通过 ΔΔCt 法分析相对表达量(相对定量)。溶解曲线:若出现单一尖锐峰,说明扩增特异性良好;若有杂峰,需排查引物或反应条件问题。 污染防控(重点)核酸污染:严格分区操作:将试剂配制区、样本处理区、PCR 扩增区分开,避免交叉污染。使用滤芯吸头,每次加样后更换吸头,避免移液器接触样本或试剂瓶口。定期用 10% 次氯酸钠或 DNA 酶清洁实验台面、移液器和仪器样品槽,紫外灯照射消毒操作区(30 分钟以上)。试剂污染:试剂分装保存(避免反复冻融),阴性对照(无模板)和空白对照(无菌水)必须设置,以监测是否污染。无锡普通基因扩增仪PCR仪代理商