当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下,DNA可进入凝胶发生搬迁,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像,而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重,发生的断链和断片越多,长度也越小,在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多,搬迁的距离就愈长。通过测定DNA搬迁部分的光密度或搬迁长度就可以测定单个细胞DNA损害程度,然后确认受试物的作用剂量与DNA损害效应的联系。彗星试验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。一起,这种技术只需要少数细胞。斑马鱼模型实验技术机构。云南北大斑马鱼实验
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斑马鱼由于养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚胎体外受精、体外发育、胚体透明,已成为生命科学研究的新宠。全球范围内有超过1500个斑马鱼实验室。利用斑马鱼,可以研究生命科学的基础问题,揭示胚胎和组织***发育的分子机理;可以构建人类的各种疾病和**模型,建立药物筛选和***的研究平台;可以建立毒理学和水产育种学模型,研究和解决环境科学和农业科学的重大问题。目前我国有250个以上的实验室利用斑马鱼开展相关科学研究。为进一步加强国内斑马鱼研究人员之间的交流,在2011年广州举办的第二届全国斑马鱼研讨会上,包括孟安明院士在内的全国斑马鱼研究学术集体商定,今后的全国性斑马鱼会议采取“PI大会”和“研究大会”的形式交替隔年举行,并决定自今年起固定在水生所召开“全国斑马鱼PI大会”。此次举行的斑马鱼PI大会也作为国家斑马鱼资源中心在水生所揭牌后所召开的一次学术庆祝大会。
而且通常斑马鱼产卵数量大,测试的样本数很多,这样一来,可以确保统计学意义上显赫性与数据的可靠性。同时,早期的安全评价还可以评估药物对多种组织的伤害程度。因此,可用于测试潜在药物对生物体的毒性评估。此外,科学家们还发现,斑马鱼也是检测水污染程度的优良物种,因为转基因斑马鱼可以根据污染物浓度的变化而发出可看到的荧光。随着研究的深入,斑马鱼在人类科学史上的地位已不可撼动,这位实验动物中的新星将和那些推动人类进步的科学家们一道永载史册。斑马鱼实验需求注意什么呢?
【斑马鱼高通量技术】斑马鱼高通量技术,是一种可支持同时间对数十、上百样品进行检测,并以相应的数据库支持整个实验体系高效运转的高可靠性筛选技术。目前,环特通过实验设计和数据分析等重要节点进行深度优化,强势推出斑马鱼高通量筛选技术。该技术可将项目交付周期缩短至10-15天,并衍生出三个梯度的技术方案。【优势】高效:斑马鱼胚胎发育速度快,其1天生长相当于鼠类8~10天,实验周期大幅缩短,效率更高。高可靠:基因相似度与人体达87%,与人体对应性强,雌鱼单次产卵超200枚,样本量大、个体差异小,结果更可靠。高性价比:斑马鱼实验用样量*为小鼠的1/1000~1/100,加之实验效率大幅提升后,带来极具吸引力的成本优势。定制灵活:方案设计灵活,可定制化程度高,能满足不同样品数量和实验目的需求。物质对淡水鱼 (斑马鱼) 急性毒性测定方法。辽宁斑马鱼实验服务平台
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模式生物斑马鱼的应用斑马鱼在工业实验室中常被用作毒理学检验,是国际标准化组织推荐的五种实验鱼种之一。但随着对斑马鱼的进一步了解,其作为模式生物在生命科学以及医学研究中的作用正在崛起。以斑马鱼为模型研究目的基因在脊椎动物中的表达和功能利用斑马鱼胚胎透明的特点,构建绿色荧光蛋白(GFP)与内源性靶蛋白的融合蛋白,通过观察融合蛋白的荧光分布情况,借以确定目的基因或目的蛋白的功能和表达特点。同时,还可通过检测绿色荧光的分布,监测外源蛋白的表达在斑马鱼中的表达与分布情况。云南北大斑马鱼实验
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