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斑马鱼养殖实验室

来源: 发布时间:2023年06月28日

斑马鱼基因敲除品系制备服务简介1.基因敲除(GeneKnockout)根据给定GeneID或Genename,分析基因保守结构域,在保守结构域或客户指定区域设计靶点并制备靶点gRNA,gRNA和Cas9共注射使基因产生移码突变,通过PCR筛选得到稳定遗传品系。2.基因敲除技术特点2.1通过将基因敲除斑马鱼品系与野生型相比较,研究者可以揭示特定基因的功能。2.2在基因组水平上将目标基因敲除,遗传背景干净清晰,是研究基因功能的金标准。服务流程▲根据客户提供的GeneID或Genename进行基因分析——▲cas9mRNA和多个gRNA靶点的设计及合成——▲高效gRNA靶点的筛选及效率验证——▲F0代斑马鱼的可遗传性筛选——▲杂合子F1代斑马鱼的基因型鉴定环特生物优势成熟的基因敲除技术快速获得稳定品系;多靶点共注射F0代验证基因功能。斑马鱼实验环境毒理学评价。斑马鱼养殖实验室

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报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼实验的用途是什么。斑马鱼实验

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关于雌性斑马鱼而言,产卵量是点评其繁殖力的常用生物目标,它与鱼类繁殖过程中的多个环节(卵子发育、雌雄交配行为、性元素刺激等)相关,并对环境化学物质具有高敏感性,能直接反应鱼类繁殖力变化。环境化学物质除了直接对亲代斑马鱼的生殖系统形成损害,还可能对其子代的正常生长发育。卵黄蛋白原在斑马鱼雌鱼老练过程中发挥重要作用,老练雌鱼在体内17β-雌二醇的刺激下,由肝脏组成的VTG经过血液抵达卵巢并加工成卵黄蛋白,促进性腺发育。幼鱼和雄鱼在正常情况下不组成VTG,但在遭到雌元素和类雌元素刺激时能组成VTG,导致鱼体内VTG浓度升高,呈现雌性体征。斑马鱼养殖实验室

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