功能性食品活性成分测定

斑马鱼早在20世纪30年代就在欧洲用于环境检测研究，但普遍认为斑马鱼正式作为一种模式生物应用于科学研究始于1972年，美国GeorgeStreisinge教授在该年开始了斑马鱼发育生物学研究和模式动物建系工作。1989年，GeorgeStreisinge教授的同事MonteWesterfield教授出版***本斑马鱼研究专著TheZebrafishBook***版。1994年，“斑马鱼发育和遗传”主题会议在冷泉港实验室召开，斑马鱼模型开始被学术界接受。1998年，发生了多件斑马鱼技术发展的大事件，美国国立卫生研究院（NIH）在该年开始大力度支持斑马鱼基因组资源开发，全球较早斑马鱼模式生物数据库ZFIN在该年成立，而全球***家斑马鱼药物研发服务外包公司也是在这一年成立。2000年，欧洲Sanger中心启动斑马鱼全基因组测序工作，并于2年后发布了***个斑马鱼全基因组序列拼接ZV1。2004年，斑马鱼国际资源中心（ZIRC）在俄勒冈大学成立。2009年，斑马鱼药物毒理学评价技术***通过FDA和EMA的GLP认证。随着国民收入水平的提高以及对营养健康的关注，消费者对保健食品的需求越来越大。功能性食品活性成分测定

食品毒理学(foodtoxicology)是研究食品中外源化学物质的性质、来源于形成以及他们的不良反应与可能的有益作用和机制，并确定这些物质的安全限量和评价食品安全性的一门科学。从毒理学角度，研究食品中可能含有的外源化学物质对食用者健康的危害，检验和评价食品的安全性或安全范围，从而达到确保人类健康的目的。毒理学的研究方法可分为两大类。一类是微观方法，另一类是宏观方法。根据采用方法的不同，可分为体内实验和体外实验。食品毒理学主要是借助于动物模型模拟引起人体中毒的各种条件，观察实验动物的毒性反应，再外推到人。保健食品毒性验证由原卫生部承担的保健食品审批职能移交到原国家药品食品监督管理局。

硬骨动物模型为理解分枝杆菌***和提供比较大潜力增强宿主保护的机制提供了扩展的平台。这些模型使筛选可能改变疾病并促进寻找新***剂的宿主和细菌因素成为可能。**近显示，斑马鱼还可以用于潜在的基于DNA的疫苗的筛选，尤其是用于鉴定保护分枝杆菌的新型抗原。因此，使用斑马鱼模型有望促进对结核病发病机制的了解，这将导致开发更好的疫苗。然而，该模型的用途不***于结核病，正如之前所见，它可以使许多其他重要传染病的研究受益。类似地，这种模式也有助于阐明在动物和人类的细菌***嗜水，绿脓杆菌，大肠杆菌中非致病性，大肠杆菌CFT073，单增李斯特菌，Myroidesodoratimimus，阪turicensis，无乳链球菌，海豚链球菌和化脓性链球菌等等。

斑马鱼作为脊椎动物，有较成熟的免疫系统，具有先天性和获得性2种免疫系统，斑马鱼免疫系统与哺乳动物相似，包括各种白细胞种群、炎症介质和信号分子。炎症的主要特征之一是局部炎症介质的释放引起***床血管扩张和血管通透性增加，从而引起热、肿胀和发红。这种炎症反应的关键功能之一是将中性粒细胞输送到受损或受***的组织中。对组织损伤或***的有力反应必须包括通过趋化刺激将先天免疫系统的细胞招募到受影响的部位。利用转基因斑马鱼（中性粒细胞特异性髓过氧化物酶启动子下表达绿色荧光蛋白（GFP）观察中细粒细胞向伤口部位迁移的数量来筛选从天然产物中提取化合物的***活性。***的其他观察指标如炎症因子也常来筛选***物质，结核杆菌素Ｂ（TTB）是来源于马尾藻类海草，研究发现TTB******脂多糖（LPS）诱导斑马鱼炎症生产的促炎细胞因子如白介素（interleukin－６，IL⁃６）和IL⁃１β（interleukin－１β），表明TTB可能被用作功能性***食品和营养保健品。肠道免疫也是近几年来研究比较多的一个方面，Ｗang等用嗜水气单胞菌***斑马鱼，发现两株高黏附性乳酸菌处理后具有肠道粘膜免疫保护作用。保健食品强制性标志为天蓝色标志。

安全性评价是利用毒理学的基本手段，通过动物实验和对人的观察，阐明某一化学物的毒性及其潜在危害，以便为人类使用这些化学物质的安全性作出评价，为制订预防措施特别是卫生标准提供理论依据。评价的步骤：目前我国现行的对食品安全性评价的方法和程序也还是按照传统的毒理学评价程序：即初步工作→急性毒性试验→遗传毒理学试验→亚慢性毒性试验(9d喂养试验、繁殖试验、代谢试验)→慢性毒性试验安全性是转基因食品生产的比较大障碍，是**们争论多的话题，是消费者不放心的环节。转基因食品真的不安全吗？在《条例》出台前后，北京大学、中科院等**对转基因食品，他们总体的观点基本一致，即转基因食品的安全性问题并不像有些人想象的那么可怕。对这个问题可以争论，但不能因噎废食，在发展转基因食品生产的问题上不能裹足不前。保健食品不是药物，不能代替药物治疗疾病。国家保健食品功能评价

保健食品系指表明具有特定保健功能的食品，即适用于特定人群使用，具有调节机体功能。功能性食品活性成分测定

Ye等人也研究了引起弧菌病的细菌鳗弧菌，观察了用减毒或越南鳗疫苗对亲代母鸡接种后斑马鱼后代中母体的转移和保护作用。他们证明了免疫细胞的发育得到了增强，母源抗体可以通过减毒活疫苗接种保护早期胚胎和幼虫免受特定病原体的侵袭。此外，刘等分析了当用减毒活的V.Anguillarum疫苗接种浸没疫苗时在斑马鱼肠，皮肤，脾脏和肾脏中的轮廓免疫反应。在水产养殖中，浸没或浴池接种是一种常见的做法，因为它可以方便地进行大规模接种，从而提供足够的保护。在特定时间内，将鱼浸入水中，使细菌处于亚致死浓度。刘等观察到抗体在抗原接触组织或免疫***中产生。张等研究了减毒活越南鳗后给予鱼粘膜组织Th17样免疫反应通过不同的疫苗接种途径。与注射疫苗相比，浸没疫苗在斑马鱼的肠道组织中引起强烈的Th17样免疫反应。在斑马鱼对疫苗反应的实验过程中，还测试了创伤弧菌（Vibriovulnificus），这是一种可引起原发性败血症和软组织***的水生病原体。结论是，CpG寡脱氧核苷酸是一种必不可少的免疫调节剂，可保护斑马鱼免受弧菌弧菌引起的***。功能性食品活性成分测定