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    培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较：：用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时，cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近，出愈率均为100％。如图7所示。培养实例8：液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较：a、用不同ph的超纯水配制液体培养基：通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大，ph通常为。分别选取ph为、、、、、，分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基，制作方法为：ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为：用ph为，ms液体培养基ph为，cs液体培养基ph为，1/2ms液体培养基ph为，1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为，观察可知，ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大，其应用于液体培养基时通常需要调节ph，过程繁琐，相比之下。使用减血清培养基能减少细胞应激反应。浙江RPMI1640培养基供应商家

    又能使培养基的破坏降低至比较低的工艺条件。许多实验研究结果表明，培养基在高温**的过程中，其营养成分的破坏在很大程度上可以用一级反应来描述其反应速度：式中—表示营养成分破环的速率，C：表示营养成分的浓度K'：为反应速度常数，1/s，应速度常数K'与温度的关系，可以使用阿累尼乌斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反应速度常数，1/S：反应的活化能（J/mol）R：气体常数，*J/mol*kT：反应的***温度，k同样，**过程中的反应速度常数也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改写成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意义是指：反应的温度从T1升高到T2，其反应的速度常数分别从k,1增加到k,2；k1增加到k2；培养基的**过程实际上是营养成分破坏、菌体死亡的两个平行性反应，对于平行性反应，反应温度的提高，其两个平行性反应的速度常数都增加，但增加的幅度（大小）却不同，其比值可以表示为：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)实验证明：营养成分为破坏的反应的活化能E的值为E,=—*103J/mol；而菌体死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。黑龙江MEM a培养基技术指导减血清培养基提高了细胞培养的重复性和可靠性。

    7)溶液应在2℃－8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。2）配制可高压**细胞培养基(1)根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分钟。(3)待溶液冷却至室温，加入无菌mol/LL－谷氨酰胺溶液规定体积、无菌％（w/v）碳酸氢钠溶液规定体积，加注射用水（20℃～30℃）至规定体积，混匀。(4)如果必要，用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(5)溶液应在2℃－8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。注意事项1）细胞培养用水一般为三蒸水（经石英蒸馏器蒸馏）或超纯水，医*生产上一般为注射用水。2）建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用，因为包装一旦打开，组分可能会变质或因受潮而结团。3）溶解干粉培养基时先加入终体积90％－95％的培养用水，添加剂加完后再补足。4）如需添加的组分较多时，某一组分完全溶解后，再添加另一组分。5）待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠，以免产生沉淀。6）所有成分完全溶解后，培养基应立即过滤或高压**，以免产生沉淀或有微生物污染。7）在过滤**时。

    微量元素在细胞内通常以与有机物结合的形式存在。其中铁在细胞中参与氧的转运；钴是维生素B12的组成部分，参与叶酸的合成和脂肪酸的合成；镍能够***脱氧核糖核酸酶、乙酰辅酶A合成酶等在细胞内具有重要功能的酶，还具有稳定核酸结构的功能；亚硒酸钠中的硒，作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅基，具有抗过氧化物能力，参与消除细胞内的脂肪酸过氧化物，提高细胞的生长速率和活性。在低血清、无血清细胞培养基中，为满足细胞生长增殖需要，常常添加一些成份：蛋白质、多肽、核苷、嘌呤、柠檬酸循环的中间产物、脂类、及一些血清替代因子等。其中蛋白质具有重要的作用，动物细胞对许多物质（难溶于水的离子或脂类物质）的摄取需要借助蛋白质的传递作用，如白蛋白、传递蛋白、贴壁蛋白等能够携带脂肪酸、***、矿物质等促进细胞生长。转铁蛋白是一种重要的传递蛋白，能够结合铁，促进细胞对铁离子的吸收，并具有***作用，其促生长作用可能与其具有生长因子的功能有关。胰岛素可促进细胞对葡萄糖和氨基酸的利用，商业化中一些生长因子以重组蛋白形式添加到培养基中，主要用来刺激细胞增殖，并可促进糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一种重要的刺激细胞生长的化合物，是脑磷酸的合成前提。无酚红培养基避免了酚红对细胞的潜在毒性作用。

    第三节**的代谢与培养基新陈代谢(metabolism)足生物有机体基本的特征之一，是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。**吸收了外界的营养，在酶的作用下将其分解，再在酶的作用下台成**菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生，紧密相关，维持了**细胞的生命，进行**的生长。通过检测**系统及代谢产物的生理，来鉴定**的试验称生化试验。生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。l.代谢试验①氧化发酵试验O-F；②糖（醇）类发酵试验；③VP和甲基红试验2.蛋白质代谢试验①蛋白水解试验；②硫化氢试验；③吲哚试验；④脱羧酶试验；③脱氨试验；⑥尿素酶试验。3.盐类代谢试验①枸橼酸盐试验；②丙二酸盐利用试验；③硝酸盐还原试验4．呼吸酶类试验①氧化酶试验；②细胞色素氧化酶试验表IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用菌名吲哚（I）甲基红（M）VP（Vi）枸橼酸盐。MEM培养基适用于多种哺乳动物细胞。山东MEM培养基技术指导

MEM培养基提供了细胞生长所需的基本环境。浙江RPMI1640培养基供应商家

    将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底**的目的。3、分批**的操作分批灭歇是在所用的发酵罐或其他培养装置中进行的，它是在配制罐中配好培养基后，通过**管道输入发酵罐等培养设备中，然后开始**。在进行培养基的间歇**之前，通常先将发酵罐等培养装置的分空气过滤器进行**，并且用空气将分过滤器吹干。开始**时，应先放去夹套或蛇管中的冷水，开启排气管阀，通过空气管向发酵罐内的培养基通入蒸汽进行加热，同时，也可在夹套内通蒸汽进行间接加热。当培养基温度升到70℃左右时，从取样管和放料管向罐内通入蒸汽进一步加热，当温度升至120℃，罐压为1*105Pa（表压）时，打开接种、补料、消泡剂、酸、碱等管道阀门进行排汽，当然在保温过程中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，这样才能不留死角，从而保证**彻底。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。浙江RPMI1640培养基供应商家