实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸,此时,菌体增殖放缓,以产酸为主,琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用,而对乙醛酸循环途径起**作用,从而导致谷氨酸产量的增加;梯度试验发现,琥珀酸添加量过**于10g/l),并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升,综合成本考虑,选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖,能够改变细胞壁的通透性,促进谷氨酸分泌到胞外,从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率;但是壳聚糖添加量(超过100mg/l)过大会导致抑菌现象发生,进而造成菌株死亡。虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,或在实施案例之外的树种实施本方法,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改,改进或范围的扩大,均属于本发明要求保护的范围。F12培养基支持多种细胞的生长和增殖。青海培养基哪个好
所描述的实施例**是本申请一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。实施例1一种优化的谷氨酸发酵培养基,其包括发酵培养基a和发酵培养基b;所述发酵培养基a首先添加,然后间隔24h添加发酵培养基b。所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羟基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基a;所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,壳聚糖80mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基b;采用常规发酵工艺:将黄色短杆菌gdk-9按8%接种量将种子液(od600nm为)接入装有60l发酵培养基a的100l发酵罐中进行发酵培养,发酵培养24h,然后添加10l发酵培养基b,继续发酵培养24h,收集发酵液;整个发酵培养过程中,控制发酵温度35℃,通风比1∶,搅拌转速300r/min,溶氧维持在20%。青海培养基哪个好使用减血清培养基减少了实验中血清带来的变异性。
3)培养方法:将配制的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中,用移液枪吸取带有无菌水的无菌种子,吹打在无菌滤纸上,用无菌尖头镊子将种子均匀点播在培养基上;于温度22-24℃、湿度50-70%、光照强度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)1/2cs生长培养基的培养结果为:哥伦比亚型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮,莲座叶均已伸展,叶色浓绿,根系发达、平均主根长为。如图1所示。对比培养例1:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例1,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:哥伦比亚型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮,莲座叶部分伸展,叶色浓绿,根系发达、平均主根长为。如图1所示。培养实例1和对比培养例1的培养结果比较:哥伦比亚型拟南芥在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100%;在相同条件下培养16d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,主要表现为莲座叶长势更好、根系更为发达。如图1所示。
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、烟酸2mg、盐酸硫胺素7mg、盐酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。将本实施例中的广适性植物**培养基命名为cs基本培养基。实施例二,本实施例广适性植物**1/2培养基,其每1000ml培养基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、烟酸2mg、盐酸硫胺素7mg、盐酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。将本实施例中的广适性植物**1/2培养基命名为1/2cs基本培养基。上述实施例中的cs基本培养基、1/2cs基本培养基与现有ms基本培养基及1/2ms基本培养基的成分对比如表1所示:表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培养基成分表上述实施例中的cs基本培养基和1/2cs基本培养基,若应用于植物**培养中的固体培养基制作,可根据实际需要添加包含但不限于适量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、琼脂、植物凝胶、卡拉胶、大量元素水溶肥等,添加量同ms培养基一致,调节ph至,121℃15min灭菌后摇匀分装。无酚红培养基在实验中减少了潜在毒性。
拟南芥根愈伤**诱导时,培养6-9d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**,培养20-22d获得淡黄色松脆型愈伤**,在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛,颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100%。如图5所示。培养实例5和对比培养例5的诱导结果比较:用上述方法进行哥伦比亚拟南芥叶片和根愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基的颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100%,但cs诱导培养基的愈伤**出愈时间比ms诱导培养基提前至少1d;在相同培养条件下,与ms诱导培养基相比,经cs诱导培养基诱导的叶片团块状愈伤**更大、诱导的根愈伤**更多。如图5所示。培养实例6:本氏***叶片及根愈伤**诱导培养实例6与培养实例5不同的地方在于,步骤(1)将;步骤(2)将2,;步骤(3)所取叶片为本氏***无菌苗叶片,用手术剪刀将无菌叶片剪成,用镊子将其平铺于诱导培养基;步骤(4)所取根为本氏***无菌苗的根,cs诱导培养基的诱导结果为:本氏***叶片愈伤**诱导时,培养15-18d的叶片明显增大增厚,叶片四周产生大量的淡绿色致密的愈伤**,愈伤**诱导率为100%,且在愈伤**团块上已开始产生多个嫩绿色的不定芽;本氏***根愈伤**诱导时,培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**。无血清培养基适用于需要无血清环境的细胞。北京Ham's F12培养基市场报价
减血清培养基减少了实验中的血清干扰。青海培养基哪个好
无芽孢:E=209—250*103J/mol。显然,(5)式的比值〉1,说明提高温度对于第二个平行反应,即菌体死亡的反应是有利的。提高温度,虽然两个平行性反应的反应速度常数都提高了,但是,达到同样的**效果,所需要的时间却缩短了,由于***个反应也就是营养成分破坏的反应速度常速增加的少,因此,有利于减少培养基在**过程中营养成分的破坏。换言之,高温短时**对于培养基营养成分是有利的。通常所说的高温短时**可以提高生产效益,其理论根据就在于此。结论1:当**温度上升时,微生物杀死速率的提高要超过培养基成分的破坏速率的增加。要减少营养成分的破坏,可升高温度**。结论2:在**时选择较高的温度、较短的时间,这样便既可达到需要的**程度,同时又可减少营养物质的损失。(二)、影响**效果的因素(1)微生物种类:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不变的前提下,t与初始菌量N0的对数成正比。(3)培养基成份:油脂、蛋白质增加微生物的耐热性。(4)传热与混合状况:影响受热均匀度。(5)培养基中固体颗粒的存在影响热穿透。(6)蒸汽中空气的存在降低蒸汽分压和**温度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物热死速率三、培养基的工业**。青海培养基哪个好