胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被发现,现在已经扩展到多种来源,包括哺乳动物(人、牛、猪和狗)、无脊椎动物和微生物等。胰蛋白酶的商业化生产主要依赖哺乳动物的胰腺组织提取或者重组表达提取。直接从哺乳动物胰腺组织中提取的缺点是生产成本高,易造成其他结构相近的蛋白污染。重组表达提取胰蛋白酶可以缩短提取时间、降低生产成本,提取的蛋白纯度高,通过优化重组表达体系可以提高蛋白的表达量,这些优势为其在医疗、食品等行业中的应用提供了更多的可能性。[1]折叠胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗?江苏进口胰酶市场报价
淡黄色的胰酶溶液能放心使用吗?能,对于胰酶呈黄色的问题,不同品牌也都对此现象进行了测试实验。变色的胰酶同样能很好的用于细胞的解离,请放心使用。细胞消化时,胰酶不去除对细胞的影响?细胞消化时,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是没有问题的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比较好去除。EDTA是一种化学螯合剂,主要作用在于能螯合Ca、Mg离子,使细胞分离。但EDTA不能被血清中和,消化后要彻底清洗去除,否则细胞易脱壁。胰酶胰酶和EDTA联合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存中国澳门重组胰酶常用知识如果消化液中含有胰酶和EDTA,好去除。
胰酶中的酚红有哪些作用?酚红在培养基中被用来作为pH指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明:酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测,在做流式细胞检测时,也会使用不含酚红的培养基或者胰酶。图 2. Phenol red test图片来源网络8、在做细胞凋亡检测时,细胞为什么不能用含有EDTA的胰酶消化?Annexin V(膜联蛋白)是Ca2+依赖的蛋白,EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V,进而影响结果,因此需选用不含EDTA的胰酶。建议放入培养箱中进行消化,时间可以长一点。随时观察细胞情况,避免消化过度;也可使用细胞刮刀将细胞刮下,后用***吹匀,比消化简单,还可避免使用胰酶带来的伤害。
胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃pH8.0条件下消化能力**强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。本产品为0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s缓冲液,不含EDTA,无酚红指示剂,经0.22μm过滤除菌。胰酶使用的时候要注意什么?
胰酶和双抗怎么保存?
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双抗的保存:双抗通常情况下在-20°C保存一年。由于该试剂在4°C下长期存放是不稳定的,分装后在-20°C下避光保存。青霉素在2-8°C存放时间不应超过4天,链霉素相对稳定一点,在2-8°C可以存放30天左右。双抗从冻融后基本成分已开始降解。胰酶的保存:胰酶可在-20°C下保存一年。随着时间延长,胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存,在使用前从-20°C冰箱取出。尽量避免在4C长期保存。 胰酶PH的变化是肉眼可观察到的。中国澳门重组胰酶常用知识
0.25%胰酶消化液(含有EDTA,含酚红)pH值为7.2-7.8。江苏进口胰酶市场报价
0.25%胰酶和加了EDTA胰酶区别是什么详细说明
细胞之间是通过CAM(细胞粘性分子)相连的,而很多粘性分子只有在有+2价金属离子,如Ca2+,Mg2+,的存在下才能行使这种功能。EDTA是钙离子的鳌合剂,在胰酶中加入EDTA的作用简单的说就是为了增加胰酶的消化作用,尤其适用于比较难于消化的细胞;同时可以减少胰消化时间,以减少酶对细胞的损伤作用。加入EDTA的消化反应不能通过加入培养液终止,必须离心才能去除EDTA,所以要掌握好消化时间。 江苏进口胰酶市场报价