(含)英文名:(含)储存条件:-20℃产品简介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其**适温度约为37℃。胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()由、除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化大多数贴壁细胞。使用说明(*供参考):1.贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,去除残余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液(),略盖过细胞即可,室温放置。(不同的细胞消化时间有所不同)③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落。 胰酶PH的变化是肉眼可观察到的。河南胰酶价格
胰蛋白酶试剂同酶速率法测定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法测定。胰蛋白酶正常值(1)RIA法:阴性。(2)酶速率法(37℃):十二指肠液:150~600μg/ml胰蛋白酶化验结果临床意义(1)升高:急性胰腺、慢性胰腺(复发期)、胰腺*、肾功能不全等。(2)降低:胰腺外分泌功能不全(慢性胰腺后期)。胰蛋白酶附注急性胰腺时血清胰蛋白酶可上升至正常人的2~400倍,一般在10~15天**正常。胰蛋白酶相关疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品说明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶为肽链内切酶,对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用,可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常**,而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物,能促进***、化疗*物向病灶渗透。胰蛋白酶适应证1.用于脓胸、血胸、外科症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。3.用于***毒蛇咬伤,曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例,均获***。胰蛋白酶禁忌证1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。2.不可用于急性症及出血空腔中。湖北EDTA胰酶牌子胰酶颜色的变化是由PH值的变化引起,归因于使用干冰运输。
细胞传代消化时所用胰酶的浓度越高是越好 贴壁细胞的消化: 常用的消化方法主要有酶消化法、离子螯合剂、物理法和冷冻法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法:贴壁干细胞酶消化传代时通常采用两种方式:1、加入胰酶等干细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;2、加入胰酶后,镜下观察待干细胞开始脱落时,弃去胰酶,加入培养液并分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对干细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的干细胞先脱落。
胰酶的作用原理是什么呢?胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链,通过在特定位置上降解蛋白,使细胞膜上和培养皿结合处蛋白降解,从而使两者分离。这时细胞在自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力的作用下成为球形。使用胰酶时需注意哪些细节问题?在使用胰酶(Trypsins)细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差,做流式时的CDMarker也可能会下降。胰酶进行分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时液体体积会膨胀,多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对于纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。实际消化后细胞状态不会有太大差异,注意控制消化时间即可。
1、胰酶是,就是说PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是-,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。3、EDTA的浓度也是质量体积比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可终止胰酶的作用,但不能终止EDTA的作用,对有些细胞来说,终止消化后的离心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH为8左右的时候**易溶解,在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8,注意,胰酶可使溶液变酸,所以要边溶边测pH,随时调整。注意,不可加过量NaOH,否则过碱,细胞会受不了。6、胰酶EDTA相对比较难溶,可用磁力搅拌器,或放入4度冰箱过夜,待溶解后过滤**。7、可配2-3乘的胰酶,这样比较节约时间和滤器,用的时候对上**PBS即可。8、储存液放在-20度冰箱冻存,使用液放在4度,用的时候不要放在27度水浴锅温浴,因为这样会让胰酶很快失效,使用前放在室温下一会。胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。河南胰酶价格
胰酶是一种复合消化酶制剂。河南胰酶价格
胰酶消化贴璧细胞原理胰酶是一种重要的消化酶,它在人体消化过程中起到了关键作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能够帮助人体消化食物中的蛋白质、脂肪和碳水化合物等营养物质。而胰酶消化贴壁细胞则是指胰酶在消化过程中与肠道内的贴壁细胞发生作用的机制。胰酶消化贴壁细胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三个过程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺内的特殊细胞合成的。这些细胞受到胃内食物的刺激后,通过胰腺神经末梢的刺激而开始合成和分泌胰酶。合成的胰酶经过胰管进入小肠。接下来是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通过胰腺分泌液的产生和排泄来实现。当胃内食物通过幽门进入小肠后,小肠壁上的细胞会分泌一种叫做胃腺素的物质,这种物质能够刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它们经过胰管进入小肠,与食物中的营养物质发生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通过两种方式作用于贴壁细胞。一种方式是直接作用,胰酶直接与贴壁细胞接触并发挥作用。另一种方式是间接作用,胰酶作用于食物中的营养物质,将其分解为小分子物质后再与贴壁细胞发生作用。 河南胰酶价格