湖南一个斑马鱼实验

中国的斑马鱼技术发展从2010年之后进入了快车道，全国首届斑马鱼学术研讨会该年在杭州召开，同年，中国**斑马鱼技术服务公司环特生物在杭州成立。2011年，斑马鱼模型和技术研究被列入中国科技部“重大新药创制”专项十二五实施计划。2012年，中国国家斑马鱼资源中心（CZRC）成立，***本系统阐述斑马鱼模型评价药物安全性技术方法的专著也在同一年由Willey出版社出版。2013年，较早基于斑马鱼研究获得的候选药物进入美国临床Ⅱ期研究，中国国内***将斑马鱼临床前药理学评价资料用于CFDA创新药物临床试验申报。斑马鱼实验周期短，大部分实验能够在一周内完成。湖南一个斑马鱼实验

斑马鱼基因突变技术服务：包括插入诱变和ENU化学诱变技术。斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务：包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体信息服务：包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法：通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法；利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体，在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞山东斑马鱼实验中心斑马鱼在基础研究领域的应用。

斑马鱼转基因品系制备服务简介1.转基因斑马鱼转基因技术包括显微注射、电穿孔技术（电脉冲介导）、精子载体法、GAL4/UAS转录系统、Tol2转座子介导、拟型反转录病毒介导、重组杆状病毒介导等方法。2.转基因技术目的2.1通过定点敲除技术进行基因鉴定和功能研究；2.2利用报告基因对受体等蛋白质进行功能研究；2.3构建各种斑马鱼突变体，通过斑马鱼疾病模型进行人类疾病研究和药物筛选；2.4构建含有特异性启动子的生物感应器，用于环境监测。3.Tol2转座子介导的转基因技术优点3.1Tol2转座子可携带大片段DNA；3.2Tol2转座子没有位置偏好性，几乎能整合到染色体的任意位置；3.3Tol2转座子的耐受范围很广；3.4Tol2作为天然的具有自主转座活性的脊椎动物转座子，能够在胚胎发育的不同时期进行有效的转移；3.5Tol2转座子介导的转基因技术能够有效克服外源基因在后代传递频率低的技术难题。服务流程▲客户提出转基因品系制备需求→▲分析可行性→▲构建载体→▲斑马鱼胚胎注射→▲founder筛选→▲F1代斑马鱼养殖→▲F2代斑马鱼养殖环特生物优势1.特有的养殖方法可缩短服务周期；2.丰富的经验和及时沟通助力科研实验。

报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼实验环境毒理学评价。

斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点，可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层，完善现有药物研发体系。将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合，可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期，降低实验成本，提高实验预测的准确性，进而提高药物研发效率，降低药物研发风险。全球医药巨头辉瑞、罗氏、诺华、葛兰素史克、阿斯利康等都逐渐开始使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。2009年，斑马鱼药物毒理学评价技术通过FDA和EMA的GLP认证，这标志着斑马鱼模型的安全药理学和毒理学评价结果可以作为正式材料纳入临床试验申报资料。斑马鱼为模式生物的研究进入到一个新的阶段。山东斑马鱼实验中心

化学品斑马鱼胚胎和卵黄囊仔鱼阶段的短期毒性试。湖南一个斑马鱼实验

斑马鱼由于养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚胎体外受精、体外发育、胚体透明，已成为生命科学研究的新宠。全球范围内有超过1500个斑马鱼实验室。利用斑马鱼，可以研究生命科学的基础问题，揭示胚胎和组织***发育的分子机理；可以构建人类的各种疾病和**模型，建立药物筛选和***的研究平台；可以建立毒理学和水产育种学模型，研究和解决环境科学和农业科学的重大问题。目前我国有250个以上的实验室利用斑马鱼开展相关科学研究。为进一步加强国内斑马鱼研究人员之间的交流，在2011年广州举办的第二届全国斑马鱼研讨会上，包括孟安明院士在内的全国斑马鱼研究学术集体商定，今后的全国性斑马鱼会议采取“PI大会”和“研究大会”的形式交替隔年举行，并决定自今年起固定在水生所召开“全国斑马鱼PI大会”。此次举行的斑马鱼PI大会也作为国家斑马鱼资源中心在水生所揭牌后所召开的一次学术庆祝大会。湖南一个斑马鱼实验

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