扫描电子显微技术的应用能从微纳米尺度分析外科植入物的结构和化学组成,解析细胞结构、细胞亚结构、细胞超微结构以及病毒结构形态,是外科植入、病理分析等不可或缺的研究手段。 扫描电镜结合能谱仪不*能得到样品的结构与形貌图,还能在微纳米尺度下进行三维重构,并能给出相应的化学信息以及样品表面的元素分析。例如利用扫描电镜观察肺组织的立体结构变化,特别是肺泡结构的形态变化,是研究高致病性侵害肺脏组织的机理的新途径。扫描电镜下的异型*细胞显示树突状,表面粗糙,且有形态各异的突起,细胞体积较大。根据细胞的超微结构变化,结合细胞的分子表达和免疫活性等生物学特性,可以为*症防治、靶向药物、针对手段的研究提供强有利的帮助。扫描电镜镜筒包括电子枪、聚光镜、物镜及扫描系统。四川推荐的扫描电镜拍照
扫描电镜(SEM)具有分辨率高和景深长等特点,因此图像层次丰富,立体感强,能够显示细胞和组织的三维结构形貌(图12-13),因此普遍应用于生物样品表面及其断面微细结构的观察。 自1966年首先台商品SEM诞生以来,发展一直很快,仪器本身性能如分辨率和多功能等不断提高外,样品制备技术也不断地改进和完善。样品制备的质量是直接决定SEM能否发挥较为佳性能,并拍出理想图片的关键所在。考虑到生物样品质地柔软、容易变形、导电性差、二次电子发射率低以及含水量多等特点,在制备SEM样品时,必须掌握以下原则: (1)每一操作过程,都应注意防止样品的污染和损伤,使被观察的样品尽可能保持原有的外貌和微细结构; (2)去除样品内水份,以利于维持SEM的真空度和防止镜筒的污染。但在脱水和干燥处理时,要尽量减少避免样品体积变小和收缩变形等人工损伤; (3)降低样品表面的电阻率,增加样品的导电性能,以提高二次电子发射率,建立适度的反差和减少样品的充放电效应; (4)观察组织细胞的表面或内部微结构,应注意和保护样品的观察面。 重庆专业的扫描电镜服务扫描电子显微镜观测电畴是通过对样品表面预先进行化学腐蚀来实现的 。
生物样品扫描电镜常规扫描电镜对样品要求:必须是干燥的,不含水分或挥发性物质;具有一定机械强度,能耐受电子束轰击;具有导电性,被激发时能够产生足够的二次电子。生物材料特点:含水分多,质地柔软,机械强度小;组成元素的原子序数低,导电性差,激发后二次电子的产额较少。制样的任务:通过一系列处理,既要尽量地保存材料的固有形态,又要改良其物理性能,使其适合在电镜下观察成像。 电镜是进行材料表征时用到一种重要工具,帮助观察材料的微观形貌。然而,在观察软/湿生物材料时(离体组织,带细胞材料等),涉及到观察样品的固定、脱水、干燥、金属溅射等步骤,处理复杂,耗时较长。
在扫描电镜中,入射电子束在样品上的扫描和显像管中电子束在荧光屏上的扫描是用一个共同的扫描发生器控制的。这样就保证了入射电子束的扫描和显像管中电子束的扫描完全同步,保证了样品上的“物点”与荧光屏上的“象点”在时间和空间上一一对应,称其为“同步扫描”。一般扫描图象是由近100万个与物点一一对应的图象单元构成的,正因为如此,才使得扫描电镜除能显示一般的形貌外,还能将样品局部范围内的化学元素、光、电、磁等性质的差异以二维图象形式显示。扫描电子显微镜在其微观结构分析研究方面同样显示出极大的优势。
扫描电镜操作基本步骤 1 、取材 扫描电镜下观察的样品尺寸要求比较宽松,一般1cm3左右样品都能适合大多数扫描电镜观察。 2 、固定 铺片培养的细胞取出浸入 PBS 中,漂洗细胞表面。然后将细胞铺片放入青霉素小瓶中,加 4 ℃ 预冷的 3% 戊二醛,在 4 ℃ 固定 2h 或过夜,吸出固定剂,用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min ,再用 4 ℃ 预冷的 1% 锇酸。在 4 ℃ 固定 1h ,然后用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min 。 3 、脱水 acetone / 醋酸异戊酯( 1 : 1 )脱水 10min ,接下来醋酸异戊酯脱水 30min ,或用系列梯度酒精( 30% 、 50% 、 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% )脱水,每种浓度酒精通过 2 次,每次 15min 。 扫描电镜可得到有关物质微观形貌的信息;对x射线的采集,可得到物质化学成分的信息。广东专门做扫描电镜哪家效果好
扫描电镜这部分主要由电子枪、电磁透镜、扫描线圈、样品室组成。四川推荐的扫描电镜拍照
扫描电镜在化学中的应用 扫描电镜技术在材料学的应用十分普遍,比如,可用扫描电镜观察研究薄膜传感器压阻的灵敏度,用于观测碳化硅颗粒增强的铝基复合材料的界面反应产物的形貌。 五、在工业中的应用 1)在半导体工业中的应用 由于半导体器件体积小、重量轻、寿命长、功率损耗小、机械性能钞好,因而适用的范围广。然而半导体器件的性能和稳定性在很大程度上受它表面的微观状态的影响。 一般半导体器件试制和生产过程中包括了切割、研磨,抛光以及各种化学试剂处理等一系列序,正是在这些过程中,会造成表而的结构发生惊人的变化,所以几乎每一 个步骤都需对扩散区的深度进行测量或者直接看到扩散区的实际分布情况,而生产大型集成电路更是如此。因此,扫描电镜被普遍应用于半导体工业中,比如,用于质 量监控与公益诊断、器件分析、失效分析和可靠性研究、电子材料研制分析等。四川推荐的扫描电镜拍照
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