罗丹明123一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。罗丹明123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。罗丹明123***用作检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。由于细胞内ATP的量与罗丹明123的荧光强度之间有相关性,此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。罗丹明123的比较大激发波长为507nm,比较大发射波长为525nm。在荧光显微镜下观察,呈现黄绿色荧光。
一:工作液配制用缓冲液或者预热的培养液直接稀释储存液到需要的工作液浓度(1~20µM),充分混匀。具体的工作液浓度使用者要根据自身实验体系进行调整。【注意】:对于细胞实验,要控制好总体稀释倍数,DMSO在培养液中的浓度不能超过0.1%,以避免DMSO对细胞的影响。
二:荧光显微镜观察1、用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。2、在载玻片上孵育细胞,用PBS或HBSS洗涤细胞。3、将Rhodamine123工作液加入载玻片并在37℃下孵育30min至1小时。4、去除Rhodamine123溶液并用培养液洗涤细胞(洗涤细胞后如果要固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20min,接着用PBS洗涤)。5、荧光显微镜观察细胞。 D-荧光素钾盐南京星叶生物科技有限公司。重庆荧光染料绿色
CY7是一种CY染料。CY为花菁(Cyanine)的缩写,是由奇数个甲基单元连接的两个氮原子组成的化合物。菁类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高的特点CY系染料常被用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记,对于蛋白抗体的标记,可以通过简单的混合反应来完成结合,下面我们介绍了蛋白抗体标记的标记方法,具有一定的参考意义。一、比较好蛋白制备1)为获得标记效果,请制备蛋白(抗体)浓度为2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值为8.5±0.5。如果pH值低于8.0,应使用1M3)如果蛋白浓度低于2mg/mL,标记效率会**降低。为获得比较好标记效率,建议**终蛋白浓度范围为2-10mg/mL。4)蛋白必须在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的缓冲液中,和铵离子,否则会影响标记效率。2.染色制备(以CY3-NHS酯为例)将无水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制备成10mM储备液。通过移液器或涡旋混合均匀计算。使用前需先使用缩合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一个可进行后续标记实验。细胞膜荧光染料发射CY7.5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。
羰花青染料***用作Di来标记细胞、细胞器、脂质体、病毒和脂蛋白。长链羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于标记膜和其他疏水结构。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它们在脂质环境中具有极高的消光系数、环境依赖性荧光和短的激发态寿命。它们在室温下是油状物,在水中发出微弱荧光,但当掺入膜中或与亲脂性生物分子结合时,它们发出高荧光且相当耐光。这些光学特性使它们成为细胞质膜染色的理想选择。一旦应用于细胞,这些染料就会在质膜内横向扩散,导致整个细胞染色[1]。DiO、DiI、DiD和DiR呈现出不同的绿色、橙色、红色和红外荧光,从而促进活细胞的多色成像和流式细胞术分析。DiO和DiI可分别与标准FITC和TRITC过滤器一起使用。其中DiI及其类似物是**常用的,因为它们通常表现出非常低的细胞毒性。此外,DiI***用于测定LDL和HDL等脂蛋白。亲脂性氨基苯乙烯基染料DiA也常用于神经元示踪[2]。
CY5.5-NHS荧光染料是一种广泛应用于生物标记和成像的荧光染料,CY5.5-NHS荧光染料具有优异的荧光性能。其激发波长约为675nm,发射波长约为695nm,位于红色光谱区域,这使得它在生物样本中具有较强的穿透力,能够深入组织内部进行标记和成像。此外,CY5.5-NHS荧光染料具有较高的荧光量子产率和光稳定性,可以在较长时间的激发下保持稳定的荧光信号,从而确保实验结果的准确性和可靠性。CY5.5-NHS荧光染料作为一种***的荧光染料,在生物科学研究领域具有广泛的应用前景。其优异的荧光性能、良好的生物相容性、***的适用范围以及易于合成和修饰的优点,使得它成为生物医学研究中不可或缺的重要工具。南京星叶生物荧光染料标记蛋白。
三:贴壁细胞染色1、将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。2、从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表面保持湿润。3、在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。4、37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞比较好培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。5、吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。四:结果检测样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。上海武汉荧光染料
花青类荧光染料属于共振染料,其特征在于具有离域电荷的氮原子(两个氮原子)之间的聚甲炔染料。重庆荧光染料绿色
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多肽、蛋白、抗体标记:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性荧光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY5COOHCY5alkyneCY5hydrazideCY5ThiolCY7amineCY7maleimideCY7azideCY7COOHCY7alkyneCY7hydrazideCY7Thiol水溶性荧光染料Sulfo-Cyanine3NHSesterSulfo-Cyanine3amineSulfo-CY3azideSulfo-CY3carboxylicacidSulfo-CY3alkyneSulfo-CY3hydrazideSulfo-CY3ThiolSulfo-Cyanine5NHSesterSulfo-Cyanine5amineSulfo-CY5azideSulfo-CY5carboxylicacidSulfo-CY5alkyneSulfo-CY5hydrazideSulfo-CY5ThiolCY7NHSesterSulfo-Cyanine7NHSesterSulfo-Cyanine7amineSulfo-CY7azideSulfo-CY7carboxylicacidSulfo-CY7alkyneSulfo-CY7hydrazideSulfo-CY7Thiol近红外I区/II区荧光染料ICG-NHSesterICG-amineICG-maleimideICG-azideICG-COOHICG-alkyneICG-hydrazideICG-ThiolICG-TzICG-DBCO 重庆荧光染料绿色
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