荧光染料的稳定性在动物成像中起着至关重要的作用,以下将详细阐述其对动物成像结果的影响。一、影响成像的准确性减少伪影产生:稳定的荧光染料能够持续发出较为恒定的荧光信号,避免因染料自身的不稳定而导致信号强度的突然变化,从而减少成像中的伪影。例如,在利用近红外荧光染料进行生物功能长期观察的研究中发现,常规的近红外荧光染料在化学稳定性和耐光性差时,会限制其作为荧光成像剂的应用1。不稳定的染料可能在成像过程中出现信号波动,使得图像难以准确反映动物体内的真实情况,影响医生对病情的判断和后续治疗方案的制定。确保目标定位准确:对于特定的动物组织或***成像,稳定的荧光染料有助于准确地定位目标区域。例如在新型嗪...
在近红外二区的应用潜力动态成像:通过扩展π共轭和增强分子内电荷转移效应,开发了一系列新的基于氧杂蒽的近红外二区染料,如VIXs。其中,VIX-4具有在1210nm的荧光发射和高亮度,可用于动态成像小鼠的血液循环,具有高时空分辨率,能够区分动脉和静脉,并测量血流体积22。***成像研究:设计构建了若干基于氧杂蒽骨架的近红外二区荧光团(命名为VIX),开展了其在***成像中的应用研究。例如,探针VIX-S在水和固体形式都能发出近红外二区荧光(约1057nm),且展现了较好的抗淬灭效果、化学稳定性和光稳定性,成为推荐的生物成像探针。基于探针VIX-S的小鼠***成像研究表明,该探针具有特异性地在脾脏...
生物医学领域在细胞荧光成像中,近红外氧杂蒽荧光染料可用于细胞荧光染色成像,如荧光染料NXD-3具有良好的细胞线粒体靶向荧光标记效果5。通过特定的荧光染料可以对细胞内的特定结构进行标记,有助于研究人员观察细胞的内部结构和功能。高分辨率熔解分析(HRM)中,不同的DNA结合荧光染料可用于PCR扩增和熔解曲线分析等。例如,SYTO16和SYTO13在多数检测中性能与商业HRM染料相当,适用于实时PCR和HRM应用1418。二、化学领域为考察小分子配基与不同核酸结构的结合机理,发展新的核酸探针分子,合成了一种新型一次甲基不对称菁染料(MTP)。MTP可作为荧光探针分子用于区别不同结构的核酸分子,其与平...
在实际应用中,环境因素对荧光染料的性能有着重要影响,通过有效控制环境因素可以显著提高荧光染料的性能。以下是一些具体的方法:控制温度温度对荧光染料的荧光发射效率有***影响。如Robertson等人在2020年的研究中提出了一种3D打印的铜比色皿支架与基于珀尔帖的温度控制器平台相结合的方法,用于稳定读取现场溶液的荧光发射31。以罗丹明B为例,通过不同水平的直流电控制珀尔帖装置,展示了该装置的温度控制能力,并测试了不同温度水平下罗丹明B的荧光效率。实验表明,在25℃至62℃的温度范围内,通过该装置可以将温度维持在±1℃以内,从而实现对荧光染料性能的稳定控制。此外,温度还会影响荧光染料的稳定性。例如...
在实际应用中,环境因素对荧光染料的性能有着重要影响,通过有效控制环境因素可以显著提高荧光染料的性能。以下是一些具体的方法:控制温度温度对荧光染料的荧光发射效率有***影响。如Robertson等人在2020年的研究中提出了一种3D打印的铜比色皿支架与基于珀尔帖的温度控制器平台相结合的方法,用于稳定读取现场溶液的荧光发射31。以罗丹明B为例,通过不同水平的直流电控制珀尔帖装置,展示了该装置的温度控制能力,并测试了不同温度水平下罗丹明B的荧光效率。实验表明,在25℃至62℃的温度范围内,通过该装置可以将温度维持在±1℃以内,从而实现对荧光染料性能的稳定控制。此外,温度还会影响荧光染料的稳定性。例如...
荧光染料具有独特的光学特性,能够在特定波长的激发光下发出特定波长的荧光。根据其化学结构和性质,可分为以下几类:有机荧光染料:萘酰亚胺、苯并吩嗯嗪和苯并吩噻嗪类染料:这类染料具有优异的光化学、物理特性和高的荧光量子产率,在生物领域具有广泛的应用,包括生物成像和光动力***29。罗丹明染料:具有良好的光学物理性质,自诞生以来就被广泛应用于生物技术中作为荧光标记物或用于生物分子的检测。其分子设计中具有疾病***功能(如**和细菌***)的罗丹明衍生物近年来引起了越来越多的研究关注33。氟硼荧光染料(BODIPYdyes):是传统的有机小分子染料,具有易于改性的结构和可调节的光物理性质。经过合理设计的...
影响成像的清晰度提高图像对比度:稳定的荧光染料可以在较长时间内保持较高的荧光强度,使得目标组织与周围组织之间的对比度更高。例如,在ATP荧光纳米探针基于ZIF-90和近红外染料用于**小鼠成像的研究中,CP@ZIF-90纳米探针具有***的光稳定性和化学稳定性,在检测ATP时具有**长的发射波长(705nm)和比较大的荧光增强(32倍),能够成功用于活细胞(293T和CT26细胞)中内源性和外源性ATP水平的实时荧光成像2。相比之下,不稳定的荧光染料可能会随着时间的推移而减弱荧光强度,降低图像的对比度,使得目标组织难以清晰地显示出来。增强图像分辨率:稳定的荧光染料有助于提高成像的分辨率,使图像...
在聚合物纳米颗粒中的稳定性:量子点被提议作为稳定的荧光标记,并与其他有机染料(尼罗红和DiI)在聚合物纳米颗粒中的包封、在不同水性或亲脂性介质中的扩散以及光稳定性方面进行了比较1015。体外转移到亲水PBS溶液中显示,8小时后,量子点、尼罗红和DiI纳米颗粒分别释放出4.2±2.2%、15.5±2.0%和0.9±0.02%。然而,在亲脂性介质中链甘油三酯和人工皮脂中,所有使用的染料都观察到更高的扩散速率。三种不同标记物的荧光强度在24小时内保持稳定。连续激光束照射使用共聚焦激光扫描显微镜表明,量子点比其他有机染料具有更高的稳定性。这表明在不同的环境中,不同化学结构的荧光染料稳定性存在差异。在分...
蛋白质定量分析:**常用的蛋白质定量分析方法是染料结合分光光度法,而荧光法测定蛋白质是利用蛋白质使染料荧光强度的变化成正比的性质。例如在pH值为3.0左右的介质中,蛋白质可与荧光桃红结合而使其荧光强度降低,且荧光降低程度与体系中蛋白质含量在一定范围内成正比,据此可拟定测定蛋白质的荧光分析方法,此方法与传统方法相比灵敏度较高6。三、印花性能研究对棉机织物进行印花时,采用不同的荧光染料可以测试印花织物的比较大反射率、亮度因子、色度坐标、荧光发射光谱以及耐皂洗色牢度和摩擦色牢度等性能。例如荧光黄染料质量百分含量在0.05%~0.1%范围内时,其印花棉织物既有明显的荧光效果,又有高可视性警示作用;而荧...
在细胞内转运机制与ABC转运蛋白的关系:在某些细胞中,如多柔比星(DOX)-耐药乳腺*细胞(MCF-7/DOX),D-荧光素钾盐是ATP结合盒转运蛋白(ABCtransporters)的底物14。ABC转运蛋白在细胞内负责物质的转运,包括将某些物质排出细胞外。研究发现,β-榄香烯(β-ELE)可以通过两种方式影响D-荧光素钾盐在细胞内的转运。一是减弱ABC转运蛋白的功能,从而减少D-荧光素钾盐的外排;二是下调ABC转运蛋白的基因和蛋白表达量,同样减少D-荧光素钾盐的外排14。在多药耐药中的作用:ABC转运蛋白与多药耐药(MDR)现象密切相关。在耐药细胞中,ABC转运蛋白过度表达,会将化疗药物等...
在实际应用中,环境因素对荧光染料的性能有着重要影响,通过有效控制环境因素可以显著提高荧光染料的性能。以下是一些具体的方法:控制温度温度对荧光染料的荧光发射效率有***影响。如Robertson等人在2020年的研究中提出了一种3D打印的铜比色皿支架与基于珀尔帖的温度控制器平台相结合的方法,用于稳定读取现场溶液的荧光发射31。以罗丹明B为例,通过不同水平的直流电控制珀尔帖装置,展示了该装置的温度控制能力,并测试了不同温度水平下罗丹明B的荧光效率。实验表明,在25℃至62℃的温度范围内,通过该装置可以将温度维持在±1℃以内,从而实现对荧光染料性能的稳定控制。此外,温度还会影响荧光染料的稳定性。例如...
电压敏感型荧光染料标记机制在胚胎***系统中,花菁-若丹宁染料NK2761被证明是检测神经元活性**有用的吸收染料。研究人员还评估了电压敏感型荧光染料在胚胎***系统中进行光学记录的适用性。从7天大的雏鸡胚胎中筛选出了分离的脑干-脊髓制品中的八种苯乙烯基(半菁)染料,如di-2-ANEPEQ、di-4-ANEPPS、di-3-ANEPPDHQ等。这些染料虽然信噪比低于吸收染料,但可以检测到清晰的光学响应。其标记机制是基于染料对电压变化的敏感性,当神经元膜电位发生变化时,染料的荧光特性也会相应改变,从而可以通过光学成像技术监测神经元的活动。不同类型荧光染料的稳定性直接关系到成像质量。黑龙江荧光染...
分散荧光染料:分散荧光桃红BG染料色浆离心50min后的比吸光度仍达到78.1%,离心稳定性较好。在55℃条件下放置5d后分散荧光染料色浆的粒径有所增加,其中分散荧光桃红BG染料色浆粒径的增加率*为7.5%,染料色浆热稳定性能较好;加热处理过后分散荧光染料色浆的荧光强度有所降低11。这表明分散荧光染料的稳定性在一定时间和温度范围内能够保持较好,但随着时间的延长和条件的变化,其稳定性会逐渐下降。在动物成像中,这可能会限制成像的时间窗口,影响对动物体内动态过程的长期观察。近红外荧光染料:近红外荧光染料的稳定性差异会直接影响成像的持久性。光稳定性高的近红外荧光染料能够在较长时间内保持较强的荧光信号,...
荧光染料的稳定性在动物成像中起着至关重要的作用,以下将详细阐述其对动物成像结果的影响。一、影响成像的准确性减少伪影产生:稳定的荧光染料能够持续发出较为恒定的荧光信号,避免因染料自身的不稳定而导致信号强度的突然变化,从而减少成像中的伪影。例如,在利用近红外荧光染料进行生物功能长期观察的研究中发现,常规的近红外荧光染料在化学稳定性和耐光性差时,会限制其作为荧光成像剂的应用1。不稳定的染料可能在成像过程中出现信号波动,使得图像难以准确反映动物体内的真实情况,影响医生对病情的判断和后续治疗方案的制定。确保目标定位准确:对于特定的动物组织或***成像,稳定的荧光染料有助于准确地定位目标区域。例如在新型嗪...
分散荧光染料:分散荧光桃红BG染料色浆离心50min后的比吸光度仍达到78.1%,离心稳定性较好。在55℃条件下放置5d后分散荧光染料色浆的粒径有所增加,其中分散荧光桃红BG染料色浆粒径的增加率*为7.5%,染料色浆热稳定性能较好;加热处理过后分散荧光染料色浆的荧光强度有所降低11。这表明分散荧光染料的稳定性在一定时间和温度范围内能够保持较好,但随着时间的延长和条件的变化,其稳定性会逐渐下降。在动物成像中,这可能会限制成像的时间窗口,影响对动物体内动态过程的长期观察。近红外荧光染料:近红外荧光染料的稳定性差异会直接影响成像的持久性。光稳定性高的近红外荧光染料能够在较长时间内保持较强的荧光信号,...
荧光染料的作用过程吸收激发光:当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时,染料分子中的电子吸收光子的能量,从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速,通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫:处于激发态的电子不稳定,会通过各种方式释放能量,回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态,而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式,将多余的能量转化为分子的振动能,从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光:当激发态的电子回到基态时,会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长,这是因为在发射荧光的过程中,电子释...
化学稳定性方面的差异芳香环融合BOPHYs:具有6,5,6,6,5,6-六环稠合环的新型红色α-苯并稠合BOPHY和具有5,5,6,6,5,5-六环稠合环的β-噻吩稠合BOPHY,与母体BOPHY相比,具有很高的化学稳定性1116。这些染料通过多种表征手段,如NMR光谱、HRMS、X射线结构分析、循环伏安法和光学测量等,证实了其化学稳定性。芳环稠合导致HOMO能级显著提高,有效扩展了π共轭,赋予了这些染料独特的结构和吸引人的光物理性质,同时也提高了其化学稳定性。对称双偶氮苯红色染料:两种新型对称双偶氮苯红色染料末端带有吸电子或给电子基团,具有良好的溶解性、优异的化学和热稳定性。在溶液和固态下均...
引入特定基团增加空间位阻:以一个兼顾光稳定性和水溶性的五甲川吲哚菁染料为母体,在中间共轭甲川直链引入氯原子和溴原子来增加染料分子的空间位阻,从而增强染料的光稳定性。由此合成出来了一系列新型近红外菁染料,且这类菁染料的斯托克斯位移大于普通多甲川菁染料24。引入大空间位阻基团提高光稳定性:设计合成的染料是以吲哚为母核,通过在母核的N原子上引入空间位阻大的苄基及其衍生物来提高染料的光稳定性。循环伏安测试表明,合成的五甲川吲哚菁染料相对于中间共轭链有环己烯的七甲川菁染料有更好的光稳定性,同时也证明在吲哚环N原子引入苄基及其衍生物确实比引入直链烷基有更好的稳定性24。开发具有光学可调基团的新的稳定近红外...
不同荧光染料标记神经元机制概述荧光染料标记神经元的机制因染料类型和实验动物的不同而有所差异。总体来说,主要是利用荧光染料的物理化学特性以及神经元的结构和生理特点来实现标记。一些染料通过扩散、电泳或弹道递送等方式进入神经元,与细胞膜或细胞内成分结合,从而发出荧光信号,便于在成像设备下观察和研究神经元的形态、结构和功能。 荧光染料在动物成像中标记神经元的机制多种多样,主要包括利用染料的亲脂性、对电压的敏感性、电泳原理、弹道递送以及基因***等方法将染料传递到神经元中,实现对神经元的标记。这些标记技术为研究神经元的形态、结构和功能提供了重要的工具,有助于深入了解神经系统的工作机制和疾病发*...
四、激光染料应用BODIPY激光染料是现代光化学研究的热门主题。这些染料的比较好激光性能是由于它们的化学稳定性、高耐热性、低光降解性,以及独特的光物理特征,其特征是可见光谱的绿–黄部分具有强吸收和荧光光谱带,荧光效率接近100%,且与周围环境的性质无关。20世纪90年代后,BODIPY作为可调谐激光染料的用途得到了推广并扩展到固态,还被应用于许多其他科技领域9。五、传感技术应用有机染料是现代传感技术非常有前景的底物。其效用基于π电子系统的“推-拉”极化以及多功能性。这些特性使有机染料能够对许多分析物产生荧光传感响应,并提供荧光增强和荧光猝灭的不同机制。例如,在水性介质以及三嵌段共聚物中,碳纳多...
引入特定基团增加空间位阻:以一个兼顾光稳定性和水溶性的五甲川吲哚菁染料为母体,在中间共轭甲川直链引入氯原子和溴原子来增加染料分子的空间位阻,从而增强染料的光稳定性。由此合成出来了一系列新型近红外菁染料,且这类菁染料的斯托克斯位移大于普通多甲川菁染料24。引入大空间位阻基团提高光稳定性:设计合成的染料是以吲哚为母核,通过在母核的N原子上引入空间位阻大的苄基及其衍生物来提高染料的光稳定性。循环伏安测试表明,合成的五甲川吲哚菁染料相对于中间共轭链有环己烯的七甲川菁染料有更好的光稳定性,同时也证明在吲哚环N原子引入苄基及其衍生物确实比引入直链烷基有更好的稳定性24。荧光开关在荧光探针、超分辨荧光成像及...
荧光染料的作用过程吸收激发光:当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时,染料分子中的电子吸收光子的能量,从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速,通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫:处于激发态的电子不稳定,会通过各种方式释放能量,回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态,而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式,将多余的能量转化为分子的振动能,从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光:当激发态的电子回到基态时,会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长,这是因为在发射荧光的过程中,电子释...
温度高温可能会导致荧光染料的稳定性下降。例如,在55℃条件下放置5d后,分散荧光染料色浆的粒径有所增加1。对于壳聚糖衍生物,虽然染料的取代对其热稳定性影响较小,但特征分解温度仍会因染料的不同而有几度的变化(小于10°C)2。光照紫外光对荧光染料的破坏较大。半花菁荧光染料反式-4-[对-(N,N-二乙醇胺)苯乙烯基]-N-乙基吡啶溴化盐(DHEASPBr-C2)在紫外光下更容易受到破坏,两种染料均不同程度地产生一些光降解产物35。量子点作为稳定的荧光标记,与其他有机染料(尼罗红和DiI)相比,在连续激光照射下具有更高的稳定性10。四、纳米材料封装纳米材料封装在荧光染料周围可以提供保护层,从而提高...
荧光染料在细胞内离子浓度测量中起着至关重要的作用,不同种类的荧光染料在测量细胞内离子浓度时存在多方面的具体差异。以下将从多个角度进行详细阐述。一、测量的离子种类不同钙敏感荧光染料:文献0提到“Calciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion”,即钙敏感荧光指示剂是**常被研究的离子之一。这类染料主要用于测量细胞内的钙离子浓度。例如在实验中,将细胞注入钙敏感荧光染料后,在高倍显微镜下观察,通过过滤特定带宽的照明光激发染料分子,使其发出荧光,从而测量钙离子浓度1。氢离子敏感荧光染料:在一些研究中...
标记神经元:在动物体内,特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元,用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓,固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光,与V层锥体细胞一致,并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像:有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线,以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育,在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作,也有利于学生...
标记神经元:在动物体内,特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元,用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓,固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光,与V层锥体细胞一致,并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像:有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线,以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育,在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作,也有利于学生...
荧光染料的作用过程吸收激发光:当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时,染料分子中的电子吸收光子的能量,从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速,通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫:处于激发态的电子不稳定,会通过各种方式释放能量,回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态,而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式,将多余的能量转化为分子的振动能,从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光:当激发态的电子回到基态时,会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长,这是因为在发射荧光的过程中,电子释...
标记神经元:在动物体内,特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元,用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓,固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光,与V层锥体细胞一致,并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像:有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线,以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育,在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作,也有利于学生...
果蝇胚胎运动神经元的脂溶性荧光染料标记机制在果蝇中,使用油溶解的脂溶性染料对胚胎运动神经元进行逆行标记。通过微注射器将一小滴染料递送到胚胎切片制备物中,与细胞膜接触的每个运动神经元都可以被快速标记。这种标记技术可以使单个运动神经元连续标记,从而清晰地显示其精细结构细节。由于脂溶性染料有各种颜色,该技术还可以实现多色标记相邻神经元。其机制主要是利用脂溶性染料能够快速扩散进入神经元细胞膜,从而实现对神经元的标记14。通过神经鞘的电泳标记神经元群体机制在昆虫中,描述了一种通过直接从昆虫的神经和神经节的神经元鞘直接从抽吸电极传递电泳染料进行神经元标记的新方法。极示踪剂分子被传递到蝗虫的听觉神经中,而不...
标记神经元:在动物体内,特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元,用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓,固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光,与V层锥体细胞一致,并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像:有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线,以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育,在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作,也有利于学生...