共转染是将一种以上类型的核酸引入真核细胞的过程。组合的一些例子包括多个质粒DNA ,siRNA和质粒DNA ，以及多个miRNAs进入同一个细胞。通常，多质粒DNA共转染的目的是将一种以上的外源基因导入宿主细胞。其应用之一是生产由几种质粒DNA成分组成的合成病毒或杂交载体。一个例子是在HEK293细胞系中，用转移、包膜和包装载体等几种质粒载体生成慢病毒。此外，多个质粒DNA的共转染也可以应用于蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)研究，以研究一种蛋白质与另一种蛋白质之间的关系。阳离子 RNA 转染试剂在结合 RNA 分子机制上存在多种差异。中国香港转染试剂疫苗
联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。北京polyplus转染试剂纳米颗粒可以参与内体途径，并可以通过细胞质将DNA运输到细胞核。
转染时间对奶牛子宫内膜原代上皮细胞转染的影响：在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因，检测两种不同转染试剂（LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000）在细胞接种不同时间后的转染效率33。结果显示，无论使用哪种转染试剂，12h的转染效率均极***高于18、24h，LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。并且，使用LipofectamineRNAiMAX作为转染试剂时，12h的荧光强度也比较高。这说明在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，选择合适的转染试剂和转染时间可以提高转染效率。同时，该研究未明确转染对细胞死亡的影响，但可以进一步研究不同转染条件下细胞的存活率，以确定在提高转染效率的同时降低细胞死亡的比较好条件。
优化转染条件MOI值对Lentivirus载体转染许旺细胞的影响：以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体，在体外对原代大鼠许旺细胞进行转染，研究不同MOI值（***复数）对转染效率的影响32。结果显示，在病毒转染3天后，各不同MOI值的培养孔中开始出现少量荧光反应，第5天时荧光数量明显增多，第7天达到高峰，第9天与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看，不同的MOI值效果不同，MOI值为5和10时转染效率较高。这表明在使用Lentivirus载体转染许旺细胞时，优化MOI值可以提高转染效率。同时，未提及该转染过程对细胞死亡的影响，但可以通过进一步的实验，如细胞活性检测等，来确定在提高转染效率的同时对细胞死亡的影响。转染时推荐使用血清减少或无血清培养基包括阳离子转染试剂，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。
RNA转染试剂是一类能够将RNA分子导入细胞内的物质，其作用原理主要涉及以下几个方面。利用电荷相互作用：许多RNA转染试剂是阳离子性的，它们可以与带负电荷的RNA分子通过静电相互作用结合形成复合物。例如，鱼精蛋白是一种天然阳离子肽混合物，由于相反电荷驱动的耦合作用，被用于细胞内核酸的递送8。鱼精蛋白不仅可以保护RNA免受生物系统中的降解，还能增强其对细胞的穿透能力。阳离子脂质体也是常见的转染试剂之一。以LipofectamineTM2000为例，它可以介导携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体转染至鸡成骨细胞9。阳离子脂质体通过其阳离子头部与RNA的负电荷相互作用，形成脂质体-RNA复合物，然后通过与细胞膜的融合或内吞作用将RNA导入细胞内。内吞作用途径：一些RNA转染试剂通过内吞作用进入细胞。如合成的8-mer两亲性反式多聚2'-O-甲基尿苷硫代磷酸三酯RNA元件（2'-OMeUtaPS），它能介导将不带电荷的聚A尾磷酸二酰胺基吗啉代序列（PMO）高效递送至HeLapLuc705细胞或肌管肌肉细胞。已确定大胞饮作用是HeLapLuc705细胞中使用的主要内吞途径。基于病毒的转染，或者更具体地称为转导，涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。贵州难转细胞转染试剂
在转染实验中使用对照对于确定所使用的转染试剂和核酸的效果和效率至关重要。中国香港转染试剂疫苗
基因注射包括通过注射将所需的核酸物质直接输送到宿主细胞核中。当细胞转染具有挑战性时，特别是当需要对宿主细胞进行遗传修饰时，这种方法是一种很好的替代方法。与其他非病毒基因传递方法一样，没有一种方法可以适用于所有不同的细胞类型，选择合适的细胞类型和核酸大小对于确保基因注射的成功至关重要。例如，先前的一项研究报道了成功生成表达cre重组酶(大小～1,000bp)的转基因小鼠细胞系。另一方面，在一项体内研究中，表达转基因的小鼠肌纤维数量与注射次数和给药质粒剂量相关。另一项体外研究进一步支持了这一观点，该研究报道了表达报告基因的宿主细胞的数量与注入细胞的核酸量密切相关。此外，微针的大小、形状和额外涂层的存在也会影响基因注射的效率，因为有报道称，涂有微颗粒的小尺寸微针(<10毫米)能够顺利地将所需的货物输送到皮肤的角质层。中国香港转染试剂疫苗