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荧光染料的作用过程吸收激发光:当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时,染料分子中的电子吸收光子的能量,从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速,通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫:处于激发态的电子不稳定,会通过各种方式释放能量,回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态,而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式,将多余的能量转化为分子的振动能,从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光:当激发态的电子回到基态时,会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长,这是因为在发射荧光的过程中,电子释放的能量一部分以热能的形式散失,导致发射的光子能量较低,波长较长。在小动物体内成像中,荧光扩散光学成像通过收集从组织中出射的扩散光,重建出组织内部的荧光产率分布。海南荧光染料Fluor 555
近红外荧光成像:一些荧光染料在近红外区域发射荧光,具有组织穿透能力强的优势。例如,苯并吩噻嗪类近红外光敏剂通过***溶酶体-膜破坏途径,利用PDT辐射产生的超氧化物(Ⅰ型)和1O2(Ⅱ型)来消融肿瘤细胞。该系列光敏剂ET-NB-C12在体外和体内*****中表现出突出的***性能29。基于塞来昔布和苯并吩噁嗪的近红外发射(700nm)荧光探针(NB-C6-CCB),在COX-2高表达的肿瘤细胞或组织中发射出近红外荧光,用于检测细胞内高尔基体中COX-2酶29。光控开关与药物释放检测:设计的***药物递送系统,以NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米晶为荧光源,并将其用静电纺丝的方式掺杂在介孔二氧化硅纤维中。通过低温氧化处理保留了纤维的出色的荧光性能和柔性,并在载药后的纤维的孔洞处加装光控开关。通过二次载药,使得纤维可以载有更多的抗**药品。与传统药物递送系统相比,该载药系统可在近红外光控制下释放药物,并且利用FRET原理,实时的检测药物释放量。脂质荧光染料luc热成像技术在动物检测方面也具有很大的潜力。
真核细胞:对于真核细胞,空间信息上的离子分布可以通过使用离子敏感荧光染料结合标准电生理技术获得。文献0提到“Adyefluoresceswhenitisilluminatedwithlightwhichcanexcitethedyemoleculetoahigherenergystate.Thischapterdiscussescalciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion,althoughdyesareavailableforavarietyofionsincludingNa+,K+,Cl-,andH+.Duringatypicalexperimentacell,inabrainsliceorprimaryculture,isinjectedwithanion-sensitivefluorescentdyeandvisualizedonahighpowermicroscope.”,即在脑切片或原代培养中,真核细胞可以注入离子敏感荧光染料,通过高倍显微镜观察来测量离子浓度1。微生物:测量微生物中类似事件的方法被证明更具挑战性。文献11提到“虽然荧光和电生理方法(包括电极使用和膜片钳)已被开发出来,用于测量真核细胞中的这些事件,但由于微生物的体积小且结合起来更复杂,因此测量微生物中类似事件的方法被证明更具挑战性。
荧光染料具有独特的光学特性,能够在特定波长的激发光下发出特定波长的荧光。根据其化学结构和性质,可分为以下几类:有机荧光染料:萘酰亚胺、苯并吩嗯嗪和苯并吩噻嗪类染料:这类染料具有优异的光化学、物理特性和高的荧光量子产率,在生物领域具有广泛的应用,包括生物成像和光动力***29。罗丹明染料:具有良好的光学物理性质,自诞生以来就被广泛应用于生物技术中作为荧光标记物或用于生物分子的检测。其分子设计中具有疾病***功能(如**和细菌***)的罗丹明衍生物近年来引起了越来越多的研究关注33。氟硼荧光染料(BODIPYdyes):是传统的有机小分子染料,具有易于改性的结构和可调节的光物理性质。经过合理设计的BODIPY能通过多种方式制备成可用于**光学成像和光学***的纳米粒子37。碳点纳米组装体:生态友好且高荧光的碳点纳米组装体因其多样化的生物应用而备受关注,尤其在对抗环境和人类健康问题方面。例如,从柿子果实中制备的高荧光氮掺杂碳点(PCDs),通过一步水热反应无需任何溶剂制备而成,具有良好的水溶性和生物相容性,可用于生物成像和***活性筛选30。通过不同的连接方法将四种氨基菁染料通过反相微乳液共价封装在二氧化硅纳米颗粒内。
在聚合物纳米颗粒中的稳定性:量子点被提议作为稳定的荧光标记,并与其他有机染料(尼罗红和DiI)在聚合物纳米颗粒中的包封、在不同水性或亲脂性介质中的扩散以及光稳定性方面进行了比较1015。体外转移到亲水PBS溶液中显示,8小时后,量子点、尼罗红和DiI纳米颗粒分别释放出4.2±2.2%、15.5±2.0%和0.9±0.02%。然而,在亲脂性介质中链甘油三酯和人工皮脂中,所有使用的染料都观察到更高的扩散速率。三种不同标记物的荧光强度在24小时内保持稳定。连续激光束照射使用共聚焦激光扫描显微镜表明,量子点比其他有机染料具有更高的稳定性。这表明在不同的环境中,不同化学结构的荧光染料稳定性存在差异。在分散荧光染料色浆中的稳定性:以苯并吡喃类分散荧光染料和萘磺酸类阴离子分散剂为原料,通过湿磨法制备分散荧光染料色浆。近红外荧光染料在实际应用中可能会受到氧气等氧化剂的影响。吉林荧光染料Alexa fluor
荧光染料在动物成像中发挥着至关重要的作用。海南荧光染料Fluor 555
在细胞内转运机制与ABC转运蛋白的关系:在某些细胞中,如多柔比星(DOX)-耐药乳腺*细胞(MCF-7/DOX),D-荧光素钾盐是ATP结合盒转运蛋白(ABCtransporters)的底物14。ABC转运蛋白在细胞内负责物质的转运,包括将某些物质排出细胞外。研究发现,β-榄香烯(β-ELE)可以通过两种方式影响D-荧光素钾盐在细胞内的转运。一是减弱ABC转运蛋白的功能,从而减少D-荧光素钾盐的外排;二是下调ABC转运蛋白的基因和蛋白表达量,同样减少D-荧光素钾盐的外排14。在多药耐药中的作用:ABC转运蛋白与多药耐药(MDR)现象密切相关。在耐药细胞中,ABC转运蛋白过度表达,会将化疗药物等排出细胞外,降低药物的疗效。而D-荧光素钾盐作为ABC转运蛋白的底物,其在细胞内的转运情况可以反映ABC转运蛋白的功能状态。因此,通过研究D-荧光素钾盐的转运机制,可以为理解和逆转多药耐药提供线索14。海南荧光染料Fluor 555
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