SpCas9蛋白(来自化脓性链球菌的Cas9蛋白)在基因编辑中的主要作用是作为核酸酶,能够精确地切割目标DNA序列。以下是SpCas9在基因编辑中的几个关键步骤和作用:1.**识别和结合**:SpCas9蛋白与一个单导向RNA(sgRNA)结合,形成RNP复合物。这个复合物能够识别并结合到基因组中与sgRNA互补的特定DNA序列。2.**PAM序列识别**:SpCas9需要一个称为原间隔子相邻基序(PAM)的特定序列作为识别目标DNA的先决条件。对于SpCas9,这个PAM序列通常是5-NGG-3。3.**DNA切割**:一旦RNP复合物与目标DNA结合,SpCas9就会在PAM序列的3个碱基对的上游位置切割DNA双链,产生一个双链断裂(DSB)。4.**引发DNA修复**:DNA双链断裂触发细胞的DNA修复机制,包括同源定向修复(HDR)和非同源末端连接(NHEJ)。研究人员可以利用这些修复机制来插入、删除或替换特定的DNA序列。5.**基因修改**:通过HDR,可以在断裂的DNA两端引入特定的DNA模板,从而实现精确的基因编辑。而NHEJ通常会导致小的插入或缺失(indel),这可以用来产生基因的敲除或敲入。6.**提高编辑效率**:为了提高SpCas9的编辑效率,研究人员可能会使用优化的sgRNA设计、蛋白质工程或嵌合融合蛋白等策略。在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或编辑工具的克隆,减少克隆过程中的非目标突变。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag

核酸内切酶VIII(EndonucleaseVIII)是一种来自大肠杆菌的DNA损伤修复酶,具有以下特点:1.**双功能活性**:核酸内切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**释放受损嘧啶碱基**:N-糖基化酶活性可以释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇,生成一个脱嘌呤(apurinic,AP)位点。3.**切割AP位点**:AP裂解酶活性可以切割AP位点的3和5端,产生一个具有3和5磷酸的碱基缺口(Gap)。4.**识别并切除受损碱基**:核酸内切酶VIII可以识别并切除多种受损碱基,包括尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。5.**与EndonucleaseIII的区别**:虽然核酸内切酶VIII与核酸内切酶III相似,但核酸内切酶VIII具有β和δ裂解酶活性,而核酸内切酶III具有β裂解酶活性。6.**应用领域**:核酸内切酶VIII可以应用于单细胞凝胶电泳、NGS建库中DNA损伤修复、酶法合成DNA中释放DNA链、碱洗脱,搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)进行含U片段的克隆等。position:absolute;left:575px;top:191px;">EcoRIPfu酶的扩增速度较Taq酶稍慢。经过基因改造的Pfu酶扩增速度可达4 kb/min,是普通Pfu酶的8倍。

重组人ITCH蛋白是一种重要的E3泛素连接酶,属于HECT(HomologoustoE6APC-Terminus)家族,在蛋白质降解、信号转导和免疫调节等多种细胞过程中发挥关键作用。ITCH蛋白通过催化底物蛋白的泛素化,调控其降解或功能改变,从而参与细胞周期、炎症反应和应激响应等生物学过程。该重组蛋白通常采用真核表达系统(如昆虫细胞或哺乳动物细胞)制备,以确保其正确的折叠和酶活性。ITCH蛋白具有典型的HECT结构域,能够特异性识别并结合底物蛋白,通过泛素-蛋白酶体途径介导其降解。其重组表达形式为研究人员提供了高纯度、高活性的蛋白工具,便于进行体外泛素化实验、蛋白相互作用研究及药物筛选等应用。ITCH在免疫调节中尤为重要,能够调控T细胞活化、细胞因子信号及NF-κB通路。其功能异常与多种疾病相关,包括自身免疫病、炎症性疾病及某些病。因此,重组人ITCH蛋白不仅是研究泛素化机制和信号通路的重要工具,也为开发相关疾病的治策略提供了有力支持。
10×DNA Loading Buffer:助力DNA电泳的关键试剂在分子生物学研究中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段的大小和纯度。而10×DNA Loading Buffer作为电泳实验中的关键试剂,其性能和特点对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。一、产品特点10×DNA Loading Buffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青等。甘油的高密度特性使得DNA样品能够快速沉入凝胶加样孔中,避免样品漂浮。EDTA则可螯合反应缓冲液中的Mg²⁺,终止反应,防止核酸外切酶活性导致的产物降解。此外,该缓冲液中添加了溴酚蓝和二甲苯青两种指示剂,分别用于指示电泳进程。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青条带约为4Kb,溴酚蓝条带约为400bp。这种双指示剂系统为电泳提供了直观的参考,帮助研究人员实时监控电泳进度。二、性能优势10×DNA Loading Buffer的性能优势在于其高稳定性和适用性。它适用于多种类型的DNA样品,包括双链DNA、单链DNA、DNA引物以及小RNA等。此外,该缓冲液不仅适用于琼脂糖凝胶电泳,还可用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),满足不同实验需求。随后,泛素分子从E1转移到泛素结合酶E2,再通过泛素连接酶E3的作用,将泛素分子连接到靶蛋白上。

重组人STAT4蛋白(HisTag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。STAT4(SignalTransducerandActivatorofTranscription4)是一种重要的转录因子,广参与免疫细胞的信号转导和基因表达调控,在免疫反应和炎症过程中发挥关键作用。STAT4的功能与机制STAT4是JAK-STAT信号通路的关键成员,主要在T细胞、巨噬细胞和树突状细胞中表达。它通过与细胞因子受体(如IL-12R和IL-23R)结合的JAK激酶相互作用,被磷酸化启动后进入细胞核,调控多种免疫相关基因的表达。STAT4在Th1细胞分化、巨噬细胞活化和炎症反应中起重要作用,其功能异常与自身免疫疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎)和慢性炎症密切相关。重组人STAT4蛋白(HisTag)的特点重组人STAT4蛋白(HisTag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然STAT4的磷酸化位点和转录启动功能。实验应用重组人STAT4蛋白(HisTag)在多种实验中表现出色:流式细胞术:检测STAT4在免疫细胞中的表达水平。还需要切割后的片段能够完美匹配,而AflII的黏性末端特性正好满足了这一需求。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag
这种预混液结合了热启动技术和优化的反应体系,为准确的基因扩增提供了强大的支持。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag
定点突变R119A破坏了Siglec-10与唾液酸配体的关键盐桥,使该蛋白丧失天然结合活性,却保留完整IgV结构域与抗体识别表位。融合His-Avi双标签后,既可通过Ni-NTA实现一步纯化,又能在体外被BirA酶单点生物素化,生成均一、定向固定的表面探针。哺乳动物表达系统保证真糖基化,>98%纯度(SEC-HPLC),内素<0.05EU/μg,适用于流式、SPR、ELISA等反向验证实验:将其包被于链霉亲和素芯片,可直接区分抗体或候选药物的配体阻断能力;与野生型共孵育,可定量测定小分子或糖聚合物对Siglec-10的抑制常数。每批次附配体缺失验证报告,4℃稳定两周,-80℃长期保存,是研究肿瘤免疫逃逸、神经炎症及CAR-T安全开关的必备阴性对照。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag
Recombinant Human Notch 3 Protein
Pep-1 (uncapped)
Recombinant Cynomolgus MMP-9 Protein
Recombinant Cynomolgus BDCA-2 Protein
Recombinant Human B7-H4 Protein
Recombinant Human IL-1 alpha Protein
Recombinant Human/Murine/Rat Activin A Protein
Recombinant Mouse MFAP4 Protein
Recombinant Canine SCF
Recombinant Human NKG2D/CD314(His-Avi Tag)