PNGaseF,Recombinant,ExpressedinYeast(酵母重组表达N-糖苷酶F)的高效性体现在以下几个方面:1.**高比活性**:该酶具有高比活性,例如可达到750,000U/mL,这意味着单位体积的酶可以进行更多的反应循环,从而提高去糖基化的效率。2.**快速反应**:与传统PNGaseF相比,某些优化版本的PNGaseF,如FastPNGaseF,能在更短的时间内完成去糖基化,要10分钟。3.**彻底去糖基化**:该酶能迅速且无偏好性地去除几乎所有N-连接的寡糖,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型糖链,确保了去糖基化的彻底性。4.**直接分析**:去糖基化后的产物可以直接用于下游的色谱或质谱分析,无需额外的纯化步骤,从而节省时间并提高分析的效率。5.**适用性**:适用于多种糖蛋白的去糖基化,包括抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白,增加了该酶的实用性。6.**优化的反应条件**:可以在变性或非变性条件下使用,增加了实验设计的灵活性,并允许在不同条件下优化去糖基化效率。7.**简化的实验流程**:由于酶的高效性,实验流程得以简化,减少了反应体积和酶的使用量,同时保持了反应的灵敏度和重复性。
确保N末端His标签的泛素蛋白在实验中的活性和稳定性,需要考虑以下几个关键因素:1.**储存条件**:按照生产商的建议,将重组泛素蛋白冻干粉储存在-25~-15℃的条件下,以保持其稳定性和活性。2.**避免反复冻融**:多次冻融会降低蛋白质的稳定性和活性。建议在使用后将剩余的蛋白质分装并储存在推荐的条件下。3.**复溶条件**:按照产品说明,使用无菌蒸馏水或推荐的缓冲液将蛋白质复溶至适当的浓度。通常建议添加0.1%BSA以增加蛋白质的溶解度和稳定性。4.**使用前离心**:在使用前,将蛋白质溶液短暂离心,以确保所有组分都沉积在底部,避免取样时的不均匀性。5.**工作浓度和体积**:根据实验设计,将蛋白质稀释至工作浓度,并尽量使用小体积以减少蛋白质的降解。6.**避免蛋白降解**:在实验过程中,使用蛋白酶抑制剂以防止蛋白降解酶对重组泛素蛋白的降解。7.**避免氧化**:在蛋白质的储存和使用过程中,避免氧化,可以通过添加抗氧化剂如DTT或TCEP。8.**避免污染**:使用无菌技术操作,确保实验器材和环境的清洁,避免微生物污染。9.**操作环境**:在4℃或冰上进行操作,以减少蛋白质降解和非特异性相互作用。Recombinant Human Siglec-6/CD327 Protein,His-Avi TagFnCas12a系统的脱靶效应较低,这对于减少非目标效应和提高物质的安全性至关重要。
在ADCs(抗体药物偶联物)的制备过程中,确保药物的稳定性和生物活性是至关重要的。以下是几个关键步骤和技术要点:1.**药物抗体比(DAR)的控制**:DAR是影响ADC稳定性的关键因素。通过控制DAR和药物负荷分布,可以促进ADC的稳定性。DAR值在2-4之间通常被认为是好的选择,但后面的DAR值需要通过稳定性试验、体内有效性和药代动力学共同决定。2.**连接子的选择**:连接子在化学过程中、血浆循环以及产品储存过程中的稳定性非常关键。连接子的选择决定了抗体药物的DAR,并且连接子的稳定性影响着ADC的整体稳定性。3.**有效载荷的选择**:有效载荷对ADC的毒性和生物活性至关重要。选择具有高度细胞毒性且能在靶细胞内有效释放的有效载荷是必要的。同时,有效载荷及其代谢形式决定了ADC分子的毒性。4.**制剂配方的优化**:ADC的制剂配方需要考虑抗体、连接子和有效载荷的稳定性和特性。pH值、缓冲液、离子强度、表面活性剂和抗氧化剂等都可能影响ADC的稳定性。5.**避免聚集**:ADC的聚集倾向比单独的抗体更高,因此需要采取措施减少聚集,如使用非离子表面活性剂和优化冻干工艺。
N末端His标签的泛素蛋白(RecombinantHumanUbiquitinProteinTagged-HisTag,UB)是一种经过遗传工程改造,在其N末端融合了His标签的泛素蛋白。以下是这种蛋白的一些特点:1.**His标签**:N末端His标签是一种常见的融合标签,用于提高蛋白质的可溶性和便于通过亲和层析进行纯化。His标签通常由6到10个组氨酸(His)组成。2.**重组表达**:这种泛素蛋白通常在大肠杆菌(E.coli)或其他宿主细胞中通过重组DNA技术表达。3.**高度保守**:泛素蛋白是一个76个氨基酸残基的多肽,在真核生物中高度保守。4.**分子量**:由于N末端添加了His标签,重组泛素蛋白的分子量会略大于天然泛素(约8.5kDa)。5.**纯度**:重组泛素蛋白通常具有高纯度(>95%bySDS-PAGE),适合用于各种生物化学和分子生物学实验。6.**溶解性**:His标签的添加可以提高蛋白质在水溶液中的溶解性,便于实验操作。7.**稳定性**:冻干粉形式的重组泛素蛋白在-25~-15℃保存,具有较长的有效期,通常为一年。8.**应用广**:N末端His标签的泛素蛋白可用于多种实验,包括蛋白质泛素化、E3泛素连接酶活性测定、蛋白质相互作用研究等。Ultra-Long Master Mix 在分子生物学实验中的应用主要集中在需要扩增长片段DNA序列的场合。
EndoS,即糖苷内切酶S(Endo-S),是一种具有高度特异性的酶,它在生物化学研究中有着重要应用,尤其是在糖蛋白和抗体药物偶联物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些关键特点:1.**特异性**:EndoS能够特异性地识别并切割N-连接糖链的壳二糖结构,即在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间的连接处进行切割。2.**应用**:在制备糖链定点ADC化合物中,EndoS被用于将小分子细胞毒药物“一步”定点连接到抗体糖基化位点,提供了一种重要的技术方法。3.**兼容性**:EndoS对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基团、荧光基团等衍生物作为底物,实现抗体糖基化修饰。4.**活性**:EndoS的活性对多肽没有严格的要求,可以接受蛋白质、肽、天门冬酰胺或游离聚糖作为底物。但是,对于具有三、四个支链的唾液酸化及去唾液酸化的聚糖,EndoS没有活性。5.**产品形式**:EndoS通常以带有His标签的形式存在,便于从反应中去除,这在实验操作中提供了便利。6.**研究进展**:EndoS在去糖基化方法研究中是一个重要的工具,特别是在研究糖蛋白的多肽部分和多糖部分的结构和功能时。
在cDNA末端快速扩增(RACE)技术中,Ultra-Long Master Mix 可以用来扩增5'和3'末端的长片段cDNA。Recombinant Mouse Carbonic anhydrase II Protein,His Tag
11A型肺炎多糖鼠单抗在疫苗研发中主要扮演的角色是作为特异性的识别分子,它可以识别并结合到肺炎链球菌11A型的多糖抗原上。这种单抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具体体现在以下几个方面:1.**免疫应答**:通过将肺炎多糖与蛋白载体(如乙肝表面蛋白)偶联,可以提高疫苗的免疫原性,使得接种疫苗的个体能够产生更高水平的抗体和免疫记忆。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠单抗的制备,可以用于定量检测33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,这对于疫苗的质量控制和效力评估至关重要。3.**促进多糖蛋白结合疫苗的开发**:利用单克隆抗体技术,可以开发出新型的肺炎多糖结合蛋白载体疫苗,这种疫苗能够激发更好的免疫反应,尤其是提高对抵抗力低下人群(如老人、化疗患者及2岁以下婴儿)的保护效果。4.**提高疫苗的特异性和亲和力**:11A型肺炎多糖鼠单抗由于其高度的特异性,可以更精确地靶向肺炎链球菌的11A型多糖,从而提高疫苗的预防效果。5.**疫苗质量控制**:单克隆抗体可用于疫苗生产过程中的抗原含量测定,确保疫苗的质量和效力,这对于疫苗研发和生产过程中的质量控制至关重要。Recombinant Mouse Carbonic anhydrase II Protein,His Tag
Recombinant Cynomolgus LRG1 Protein
Recombinant Biotinylated Human SEZ6 Protein
Recombinant Mouse BID Protein
Recombinant Mouse Carbonic anhydrase II Protein
Recombinant Rhesus macaque CD4/LEU3 Protein
Recombinant Cynomolgus IL-21R Protein
Recombinant Human SIRP alpha/CD172a
Recombinant Mouse DR6/TNFRSF21 Protein
Recombinant Human TSLPR Protein
Recombinant Human IGFBP-3R Protein